淋巴特异性酪氨酸磷酸酶变异体 (Lyp/Pep)R620W的免疫调控分子机制

Encoded by the PTPN22 gene, Lyp (lymphoid-specific tyrosine phosphatase) was initially implicated in autoimmune disease and a PTPN22 allele encoding a Lyp variant (Lyp620W) is associated with risk for numerous autoimmune diseases. Lyp is homologous to murine Pep. The research of the thesis will define the pathways that the Lyp/Pep variant causes the immune cellular dysfunction thus leading to autoimmune disease so as to find and illustrate the molecular mechanism of Lyp/Pep and its variant with autoimmunme disease, using mice expressing the murine Lyp620W equivalent Pep619W, immunoprecipitation, flow cytometric analysis, transwell assays, qPCR etc. Studies of Lyp/Pep and its variant will enhance our understanding of the molecular mechanism of autoimmunme disease causedcausede by Lyp620W, and find novel diagnosis and treatment targets thus provide new targets for rheumatoid arthritis (RA) and other autoimmune disease treatment.

淋巴特异性酪氨酸磷酸酶(Lyp)由PTPN22基因编码，与小鼠Pep同源，是目前广泛研究的酪氨酸磷酸酶之一。Lyp620W 为PTPN22等位基因编码的Lyp变异体，目前的研究提示其与多种自身免疫性疾病相关联。本课题将建立表达与人LypR620W相似的PepR619W变异体敲入小鼠，借助免疫沉淀反应、流式细胞分析、Transwell侵袭实验及荧光定量PCR技术，进一步研究其对淋巴细胞，树突状细胞及免疫调节细胞功能及信号传递通路的影响。拟鉴定出Lyp/Pep变异体所致免疫细胞功能异常并最终导致自身免疫性疾病的途径，以阐明Lyp/Pep及其变异体导致自身免疫性疾病病分子机制，以及发现新的诊断和治疗靶标，从而为类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的有效治疗提供新策略。

淋巴细胞特异性酪氨酸磷酸酶(Lyp)的编码基因PTPN22的变异与多种自身免疫性疾病相关，但Lyp变异体LypR620W导致自身免疫性疾病机制尚不清楚。我们利用Lyp鼠同源基因Pep变异体PepR619W基因敲入小鼠，进一步研究了LypR620W对T淋巴细胞、树突状细胞及调节性Ｔ细胞功能的影响及机制。我们发现,Pep619W促进树突状细胞的发育和分化以LPS和CpG刺激导致的Toll-like Receptors (TLRs)的激活和信号传递分子的磷酸化。我们还在实验性炎症性关节炎的动物模型中验证了PepR619W变异体促进自身免疫反应的功能在此基础上，我们进一步探索了Lyp及其变异体调节自身免疫功能的分子机制。首次发现了Lyp通过与GRK2结合并调节其磷酸化水平和稳定性，从而促进趋化因子介导的T淋巴细胞趋化移动和体内迁移以及Lyp通过结合关键的免疫调节因子Cbl并影响其磷酸化水平，从而影响Cbl介导的免疫调节功能。此外，我们还探讨了Lyp对调节性T细胞的分化和功能的影响，并探讨了Lyp变异体通过对调节性T细胞分化和功能的影响从而发挥其对自身免疫功能的影响可能性。以上结果初步探讨了Lyp变异体调节自身免疫，以及促进自身免疫性疾病发生发展的机制，为进一步阐明Lyp变异体影响自身免疫性疾病的机制提供了新的证据。