MAL基因在口腔鳞状细胞癌发生中作用的研究

肿瘤分子发病机制的阐明以及诊断、治疗候选靶基因的发现，有赖于对肿瘤发生、发展相关基因筛选和深入的功能研究。本项目是在对口腔颌面部最常见肿瘤-鳞状细胞癌进行大规模的基因表达谱检测和聚类分析的基础上，充分利用功能基因组学和模式生物学学已有的成果和技术平台,重点对课题组前期筛选到的口腔鳞癌密切相关基因-髓鞘淋巴相关蛋白（MAL）基因进行深入的功能研究。在已确定该基因下调表达是一个口腔鳞癌主要分子变化的基础上，应用表遗传技术分析下调表达的原因。应用基因转导和RNA干扰技术确证MAL基因的作用；应用MAL基因缺陷鼠动物模型，通过表型和基因型的分析和研究，结合化学致癌剂诱导口腔癌实验，研究MAL基因在口腔鳞癌发生、发展中发挥的关键作用；进一步对MAL基因敲除鼠及诱导的口腔癌的基因表达谱进行分析和验证。研究结果能为MAL基因作为口腔鳞癌诊断和治疗新的生物标志物提供实验依据，具重要理论意义和潜在应用价值。

本项目是在对口腔鳞癌及配对癌周正常组织进行大规模的基因表达谱芯片筛选和聚类分析的基础上，对课题组前期筛选到的口腔鳞癌显著下调基因-髓鞘淋巴相关蛋白（MAL）基因进行深入的功能研究。取得了以下研究成果：确定了MAL基因在48例口腔鳞癌组织标本和9种口腔鳞癌细胞系中表达显著下调，验证了前期基因表达谱芯片筛选结果。证实了MAL基因启动子高甲基化是导致MAL基因在口腔鳞癌表达下调的分子机制之一。在低表达MAL基因的口腔鳞癌细胞中外源性过表达MAL基因，能显著抑制口腔鳞癌细胞增殖能力、克隆形成能力、侵袭能力，促进口腔鳞癌细胞凋亡，影响口腔鳞癌细胞周期，抑制口腔鳞癌裸鼠皮下移植瘤的生长，在基因功能学上确定了MAL基因与口腔鳞癌发生发展密切相关。成功构建了MAL基因缺陷型小鼠，完成了MAL基因缺陷型小鼠的保种、繁育、基因型和表型研究。应用4NQO化学致癌剂诱导口腔黏膜癌变实验证实了MAL基因缺陷型小鼠较野生型小鼠在肿瘤发生时间上显著提前，发生肿瘤的数目显著增多，发生肿瘤的体积显著增大，肿瘤的进展速度显著增快，在模式生物学上证实了MAL基因与口腔鳞癌发生发展密切相关。为MAL基因作为口腔鳞癌新的诊断、治疗靶点提供有力实验依据和理论基础。