抑癌基因SARI 在CML BCR/ABL信号通路中的作用及其分子机制的研究

尽管针对BCR/ABL TK活性的小分子抑制剂格列卫（伊马替尼）在CML治疗中取得了重大进展，然而急变和耐药两大问题仍然存在，主要由于BCR/ABL导致CML发生发展的分子机理尚不清晰。新发现的抑癌基因SARI在多种肿瘤细胞中表达水平均明显降低。我们的前期研究发现，CML患者外周血和k562细胞中SARI的mRNA表达亦较正常细胞明显降低；而以伊马替尼处理k562细胞12h后,其SARI mRNA表达显著上升，提示SARI可能是BCR/ABL的下游靶基因。本项目拟通过肿瘤细胞模型调节SARI基因的表达来进一步探讨其在BCR/ABL信号通路中的作用，并利用基因芯片寻找和验证SARI的靶基因，以期初步阐明SARI是否是伊马替尼诱导CML细胞凋亡所必需，揭示SARI在CML发生发展和伊马替尼耐药中的分子机制，为寻找CML治疗的新靶标奠定基础，并为其它肿瘤的恶变机制研究和治疗提供一定的理论依据。

本项目按研究计划针对抑癌基因SARI在慢性粒细胞白血病（CML）中的作用进行了探讨，主要从以下几个方面进行了具体研究：1. 通过siRNA特异性干扰K562细胞中SARI表达情况，观察干扰SARI mRNA表达后伊马替尼抗K562细胞凋亡作用的影响；2. 通过慢病毒载体构建在K562细胞中高表达SARI基因，确定其生物学影响；3. K562细胞中高表达SARI 基因，观察基因表达谱系和miRNA谱系变化；4. 进一步分析差异表达miRNA在CML患者中的表达变化及与SARI的相关性。研究结果表明：1. SARI基因参与酪氨酸抑制剂（STI571）诱导细胞凋亡的作用；2. SARI基因参与K562细胞的增殖和凋亡调节；3. 高表达SARI基因后miRNA谱系差异分析有显著意义；4.初发CML患者骨髓细胞中SARI表达降低，miR-17、miR-21表达与其有一定相关性。总之，本研究初步确定了SARI基因在CML中的重要作用，为进一步深入研究SARI基因及相关miRNA参与CML的致病机理提供了数据支持。