血清miR-696在肌肉-肝脏对话调节代谢的机制研究

To analyse the microRNAs in sera of ob/ob mice with Solexa sequencing method, and real-time quantitative PCR validates Solexa results; Observing the change of significantly elevated serum microRNA in main tissues of insulin resistance development, biological function, the effect of secretory microRNA on protein targets and insulin tolerance test in mice. Study on serum microRNA, as a signaling molecule, in the regulation of insulin resistance in type 2 diabetes.

采用Solexa测序方法对ob/ob肥胖小鼠血清中的microRNAs进行测序分析；实时定量PCR 对Solexa结果进行验证；观察血清中显著升高的microRNAs在胰岛素抵抗主要发生组织中的变化；选取变化最显著的microRNA 进行生物学功能鉴定，观察血清中分泌的microRNA对靶细胞蛋白表达的影响，对小鼠胰岛素抵抗发生的影响。研究血清microRNA作为信号分子在胰岛素抵抗行形成及2 型糖尿病发生中的调节作用。

MicroRNA（miRNAs）是一类内源性长约19-23个核苷酸的小分子非编码RNA，通常在转录后水平和翻译水平调控基因的表达。过氧化物酶体增殖物活化受体协同刺激因子-1α (PGC-1α) 是一种核受体辅助激活因子，PGC-1α可以调节线粒体的生物合成、氧化能力和能量代谢，PGC-1α在肝脏中的主要作用是促进肝糖异生及调节肝脏脂肪酸氧化。本项目研究发现2型糖尿病动物模型ob/ob小鼠和正常C57BL/6小鼠肝脏中PGC-1α的表达与miR-696的含量呈显著的负相关关系，进一步通过体内外实验证实并研究了miR-696对PGC-1α调控的分子机制及其在肝脏糖异生中的作用。研究结果表明，MiR-696能够直接识别PGC-1α的3’-UTR，发挥着负调控PGC-1α表达的作用，PGC-1α通过共激活转录因子HNF-4α、FOXO1调节肝脏糖异生关键酶的表达，进一步影响肝脏糖异生和胰岛素抵抗的发生和发展。