STAT3信号通路协同TGF-β1诱导肝星状细胞活化在肝纤维化向肝癌进展过程中的作用机制研究

慢性肝炎发展为肝纤维化，部分患者向肝细胞肝癌（HCC）转变是慢性肝病临床转归特征。肝星状细胞（HSC）的活化增殖是肝纤维化发生发展的中心环节；也是影响HCC间质微环境、上皮向间充质转化（EMT）和肝细胞癌变的最重要影响因素。我们的前期研究证实随患者慢性肝纤维化进展和HCC发生，STAT3信号通路高度激活。结合文献报道STAT3在肿瘤细胞中与TGF-β1具协同关联性，及其对HCC具致癌活性。本课题拟从三方面深入研究：（1）在二乙基亚硝胺（DENA）大鼠（模拟肝炎→肝纤维化→HCC模型）和TGF-β1活化的HSC中，了解STAT3通路的表达及其对细胞凋亡/细胞周期/血管生成的功能。（2）TGF-β1活化HSC后，激活/抑制STAT3，检测共培养的肝细胞是否发生EMT或肿瘤转变。（3）STAT3抑制剂AG490干预DENA大鼠是否逆转肝纤维化和肝癌发生。期望对肝纤维化疾病的机制和防治提供新理论。

信号转导和转录激活分子3（Stat3）和转化生长因子-β1 (TGF-β1)影响肝纤维化发生发展及肝细胞肝癌（HCC）间质微环境、上皮间充质转化（EMT）的作用尚不清楚。本课题研究Stat3和TGF-β1信号的串话对肝星状细胞活化和肝癌细胞EMT的作用机制。结果显示：（1）对肝纤维化的影响作用：Stat3和TGF-β1在慢性乙型肝炎（CHB）患者和二乙基亚硝胺 (DEN)诱导的肝纤维化大鼠模型中表达增加，且与肝纤维化程度正相关。在体内和体外研究中，Stat3可增强TGF-β1表达，后者是肝纤维化的最强刺激因子；而通过siRNA-Stat3（siStat3）病毒转染静默RNA或Janus激酶2抑制剂（AG490）可抑制TGF-β1表达。Stat3串话TGF-β1信号通路，可最大程度活化HSC，并增加纤维化相关产物基因和蛋白表达。STAT3失活，则TGF-β1失去促HSC纤维化细胞因子分泌和抗HSC细胞凋亡特性。（2）对肝癌EMT的影响作用：Stat3和TGF-β1均在肝癌病人的肝组织中高表达，而肝癌细胞株中Stat3和TGF-β1的表达与间质标志物呈正相关，上皮标志物呈负相关。通过抑制或促进Stat3及TGF-β1后，肝癌细胞出现侵袭或转移活性的改变，且Stat3联合TGF-β1处理的肝癌细胞侵袭或转移活性最强，而TGF-β1的促细胞侵袭或转移能力可被AG490而减弱。因此，我们推论Stat3具有串话TGF-β1共同促进HSC活化、加剧肝纤维化、促进肝癌细胞EMT发生的作用机制。