鸡Prdm14克隆及其在原始生殖细胞特化及多能性维持中的作用

原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)对种系传递有重要的意义，鸡PGCs起源尚不明确。Prdm14是编码PR结构域蛋白的基因家族成员之一，在生殖细胞发育及多能性维持中有重要作用。鸡基因组中有Prdm14保守序列，但全序列尚未被克隆，在禽类中的作用也无相关研究。我们在发育早期鸡胚胚盘(含PGCs前体)中检测到Prdm14的表达，表明它在鸡PGCs特化中可能有重要作用，但具体作用以及作用机制还需要进一步研究。本研究拟克隆鸡Prdm14全序列，并对鸡胚Prdm14时空表达模式进行系统究；通过RNAi，体外和体内转染PGCs(或其前体细胞)，抑制Prdm14表达，检测对细胞多能性相关基因及生殖细胞特异性基因表达的影响，及对配子产生的影响。通过上述研究明确Prdm14时空表达模式，在细胞和胚胎水平揭示其在PGCs特化中的作用，为了解禽类PGCs特化及多能性维持提供线索。

Prdm14是编码PR结构域蛋白的基因家族成员之一，在生殖细胞发育及多能性维持中有重要作用。Prdm14在禽类中的表达模式和作用还不清楚。在本研究中,克隆了鸡Prdm14部分序列，并对鸡胚Prdm14时空表达模式进行了系统究；通过RNAi，转染PGCs前体细胞，抑制Prdm14表达，检测了细胞多能性相关基因及生殖细胞特异性基因表达的影响。通过上述研究,明确了Prdm14在禽类中的时空表达模式，在细胞和胚胎水平揭示其在PGCs特化中的作用，为了解禽类PGCs特化及多能性维持提供了线索。此外，还研究了Prdm14在人Naïve stem cell和Primed stem cell中的表达情况，了解Prdm14在不同物种干细胞中的表达及作用。