CGRP及其受体亚单位RAMP1联合MSCs调控平滑肌细胞增殖对再狭窄的干预研究

PCI术后再狭窄一直是临床亟待解决的问题。动脉内皮损伤、VSMCs增殖及局部炎症反应是再狭窄的主要机制，综合干预这些因素将有助于降低再狭窄。我们既往研究显示，MSCs移植治疗颈动脉粥样硬化并球囊损伤，可促进损伤动脉的内皮化、抑制内膜增殖；进一步的实验移植RAMP1修饰的MSCs，结果显示在进一步增强上述效应同时,还表现出一定的促VSMCs凋亡作用。但CGRP及其受体亚单位RAMP-1对VSMCs增殖的调控及其对再狭窄的作用机制尚不清楚。结合前期工作和目前研究进展，我们提出CGRP修饰的MSCs移植可能从促进内皮化和抑制VSMCs增殖等多方面干预再狭窄。本项目采用CGRP修饰MSCs移植联合靶向沉默RAMP-1基因，观察对VSMCs增殖的靶向调控作用及其对血管再狭窄可能的干预机制，为基因工程改造MSCs发挥其最大效应和多重干预再狭窄提供的理论和实验支持。

冠心病心肌梗死是严重威胁人类生命健康的临床常见疾病。 PCI技术的广泛应用显著地改善了冠心病的临床疗效及预后，但PCI术后再狭窄一直是临床未能解决的重要问题。再狭窄主要与新生内膜过度增生有关，其中动脉内皮损伤的延迟修复和血管平滑肌细胞（VSMCs）的增殖和迁移起着关键的作用。我们前期研究显示：RAMP1修饰的MSCs 移植除了改善梗死后心功能同时，还抑制血管球囊损伤后VSMCs迁移及增殖，促使VSMCs凋亡，抑制新生内膜过度增生，减轻血管成形术后再狭窄率。RAMP1是CGRP受体的信号肽，RAMP1对血管平滑肌细胞的抑制作用是直接作用还是间接介导CGRP效应性增强发挥作用呢？目前未见相关研究，为了进一步证实RAMP1对VSMCs的作用机制。本课题利用CGRP 及其受体亚单位RAMP-1 联合MSCs来观察对VSMCs 增殖及调控作用。结果显示：MSCs分泌的CGRP更能抑制过表达RAMP1的VSMCs增殖，使VSMCs在G0-G1明显增加，而VSMCs的表型由收缩型向合成型转换明显减少。而当沉默VSMCs中的RAMP1后，CGRP对VSMCs的作用明显减弱，因而推断RAMP1是调节CGRP关键信号肽，慢病毒转染细胞后不影响细胞的效应性。