基于瘦素抵抗理论探讨扶正解毒祛瘀方药对肺癌恶病质“摄食-免疫”关键环节的机制研究

Cachexia is the major cause of death of cancer，how to increase appetite and immune is most important.In this research,leptin plays an important role in accommodation of feeding center and immune system.In prophase research，we discover that Strengthening the Body Resistance Detoxify and Dispelling Blood Stagnate can improve cachexia，this experiment is intend to lung cancer rat as object of study，adopting immunifaction detecting the level of leptin in blood and hypothalamus, flow cytometry detecting the level of T cell+NK，electrophysiology technique detecting promoting and suppressing appetite，western blotting detecting neural transmitter of feeding center. The purpose analysis that pathogenesis of lung cancer cachexia，provide the theory and experiment evidence of traditional Chinese and western medicine comprehensive therapy of lung cance cachexia

恶病质是恶性肿瘤晚期患者主要致死原因，如何促进食欲，提高免疫功能为治疗的关键环节。本研究以"瘦素"作为一个深入了解摄食中枢调节与机体免疫功能的新切入点，在前期研究发现"扶正解毒祛瘀"方药可改善恶病质机体状态的基础上，以肺癌恶病质荷瘤鼠为研究对象，采用酶联免疫法检测血清瘦素及下丘脑瘦素受体水平、流式细胞检测淋巴细胞亚群、实时定量PCR技术检测下丘脑促食欲/致厌食肽神经通路信号传导，蛋白印迹技术检测摄食中枢网络中NPY的Y1和Y5受体，α和γ-促黑色素细胞激素的神经递质水平，阐明肺癌恶病质状态是否存在着"瘦素抵抗"现象，进一步揭示"扶正解毒祛瘀"方药对外周血清瘦素及下丘脑瘦素受体水平的影响，中药对摄食中枢神经通路的作用机制，从摄食中枢和免疫功能两条途径联合能否达到改善肺癌恶病质机体状态，以深入解析肺癌恶病质的发病机制，为中西医综合治疗肺癌恶病质提供理论和实验依据。

癌症恶病质是指由于癌症进展而出现的体重下降、厌食及衰竭三联征.恶病质患者常常出现食欲不振、厌食症状，因此如何改善癌症恶病质患者食欲，提高机体免疫功能是治疗癌症恶病质关键环节。. 本研究C57BL/6小鼠右腋皮下接种lewis肺癌细胞，复制肺癌恶病质小鼠模型，将小鼠分为空白对照组、模型对照组、消岩汤组、甲地孕酮组，每组10只，进入恶病质状态后灌胃给药，消岩汤组给予消岩汤水煎剂，甲地孕酮组给予醋酸甲地孕酮混悬液，空白对照组和模型对照组给予等量生理盐水。观察小鼠一般状态，记录体质量、瘤体质量、去瘤体质量、右下肢腓肠肌质量，计算抑瘤率，ELISA法检测血清瘦素及其受体、TNF-α、IL-6水平，Real time PCR法检测下丘脑NPY、AgRP、POMC、CART mRNA及骨骼肌蛋白MAFbX和MURF-1因子水平，运用流式细胞术检测血清中T细胞亚群+NK水平。接种后第18天，消岩汤组和甲地孕酮组小鼠体质量较模型对照组均有提升，差异有显著性（P＜0.01）。模型对照组小鼠腓肠肌质量低于空白对照组小鼠，差异有统计学意义（P＜0.01），而消岩汤组腓肠肌质量有所提升，差异有显著性（P＜0.05）。与空白对照组相比，药物干预后，消岩汤组瘦素水平升高，差异显著（P＜0.01）。消岩汤组与甲地孕酮组均能降低小鼠TNF-α、IL-6水平（P＜0.05），且消岩汤组对TNF-α、IL-6的下调作用更明显（P＜0.01）。在血清中T细胞亚群+NK水平测定中，证明消岩汤可提高免疫功能。与模型对照组比较，消岩汤组能上调恶病质小鼠下丘脑AgRP mRNA水平，并下调POMC、CART mRNA水平。但与假说相反的是，实验结果发现消岩汤干预后出现促食欲基因NPY水平含量未上升，只是和健康小鼠组相似，属于正常范围内。空白组反而出现NPY水平含量上升，实验观察中未发现肺癌恶病质小鼠进食量增加，炎症环境可导致NPY升高，故会出现消岩汤干预后，NPY水平含量与健康小鼠相似，同时亦提示消岩汤具有改善癌症恶病质机体炎症作用，是本研究结果的意外发现。. 本实验又增加了研究内容，本研究结果表明，肺癌恶病质小鼠中存在着肿瘤坏死因子-α、IL-6等炎症细胞因子升高，肌肉萎缩，MAFbX和和MURF-1）基因表达，减轻癌症恶病质炎症反应，改善肺癌恶病质肌肉蛋白质降解，抑制肌细胞萎缩的目的。