基于复杂反胶束逆流色谱系统的抗肿瘤活性天然蛋白分离新技术与新方法研究

构建复杂蛋白质分离和富集的新技术与新方法是蛋白质化学和组学研究中的重要课题之一。本项目集成了反胶束溶液对蛋白的溶解特性和逆流色谱的高效分离和富集能力，构建了（1）反胶束溶液-缓冲盐-固相吸附剂液-液-固-三相逆流色谱；（2）混合反胶束逆流色谱；（3）亲和配基反胶束逆流色谱三种复杂的新型蛋白质分离和富集系统。采用分步分离和交叉结合分离的梯度洗脱模式，在保持蛋白活性的前提下对来自小红参、半夏和蚯蚓等资源中具有显著抗肿瘤活性的天然蛋白进行有效的分离和富集。采用液相色谱、电泳、质谱、色谱质谱联用、单晶衍射及相关蛋白数据库对分离所得蛋白进行分析和鉴定，采用园二色谱、导数和荧光光谱等技术对反胶束逆流色谱的蛋白分离机制作初步探讨。该项目旨在通过高新技术的集成化来构建新型的蛋白分离和富集色谱系统，为生物大分子的研究提供新思路和新方法，并以期发现具有显著抗肿瘤活性的天然蛋白，为创新药物的研制提供资料。