猪繁殖与呼吸综合征病毒感染激活NF-κB的信号通路及其生物学效应研究

NF-κB是广泛存在于各类细胞中的一种转录因子，调控许多基因的转录，在免疫应答、炎症反应和抗细胞凋亡中发挥重要作用。猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是严重危害全球养猪业的重要病毒性传染病。PRRS病毒(PRRSV)感染能显著激活NF-κB，并可能参与天然免疫反应和机体炎症反应，但其作用的分子机制尚不清楚。本课题拟采用NF-κB荧光素酶报告系统和免疫共沉淀、基因芯片等技术解析PRRSV激活NF-κB的信号通路，挖掘可能与NF-κB激活相关的PRRSV编码蛋白并确定其功能域，揭示PRRSV感染后通过激活NF-κB而调控的炎症因子和细胞因子。通过上述研究，将有望发现PRRSV感染激活NF-κB的信号通路及参与激活的关键蛋白，阐明PRRSV感染激活NF-κB在天然免疫反应和炎症反应中的作用，为揭示PRRSV的分子致病机制和免疫机理奠定基础，为研制安全、高效的PRRS疫苗提供理论依据。

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是严重危害全球养猪业的重要病毒性传染病。PRRS病毒(PRRSV)感染能显著激活NF-κB，参与天然免疫反应和机体炎症反应，但其作用的分子机制尚不清楚。本项目采用NF-κB荧光素酶报告系统和Western Bolt等技术发现PRRSV感染后能显著激活p65、p38、ERK和JNK等转录因子; 通过特异性抑制剂和Knock-down等方法分析了PRRSV激活NF-κB的信号通路，发现PRRSV可能通过MAPK和TLR2/4信号通路激活NF-κB；分析了PRRSV编码的所有非结构蛋白和结构蛋白在激活NF-κB中的作用，发现PRRSV编码的nsp2和N蛋白能显著激活NF-κB，并通过缺失突变的方法确定了它们激活NF-κB的功能域；揭示了PRRSV感染后通过激活NF-κB而调控的一些炎症因子和细胞因子；发现PRRSV可能通过抑制MiR-125b的表达而激活NF-κB；同时，在干扰素抑制PRRSV复制方面取得了一些进展。在本项目的资助下分别在Virus Genes，Antiviral Research， Molecular Immunology，Virology Journal 和PLoS ONE等杂志上发表SCI论文5篇，培养硕士研究生2名。