Wip1经p53-Mdm2信号环路调控星形胶质细胞炎性活化对RGCs凋亡的影响

The inflammatory activation of retinal plays a pivotal role in retinal ganglion cells (RGCs) apoptosis. Previous studies reported that Wip1 and p53-Mdm2 signaling participated in regulation of inflammatory activation of astrocytes, and Wip1 could affect the phosphorylation state of Mdm2. Meanwhile, we have found that Wip1 involved in inflammatory activation of astrocytes in epiretinal membranes and optic nerve injury, and Wip1 can regulate the expression of Mdm2. We therefore speculated that Wip1 via p53-Mdm2 signaling regulates astrocytes activation responses in RGCs apoptosis. We aim to determine the involvement of Wip1, p53 and Mdm2 in inflammatory activation of astrocytes in vivo and in vitro; investigate the effect of Wip1 in phosphorylation, ubiquitination and molecular stability of Mdm2, and also in the expression and function of p53 and its downstream molecules; evaluate the effect of Wip1 intervention on p53-Mdm2 signaling, inflammatory activation of astrocytes apoptosis, RGCs apoptosis and visual function. All the data may support basic theory and molecular target for therapy in retinal degenerative disease diseases.

星形胶质细胞炎性活化是视网膜神经节细胞（RGCs）凋亡的关键环节。研究发现，Wip1和p53-Mdm2信号环路均可参与星形胶质细胞炎性活化，同时Wip1可影响Mdm2磷酸化状态。我们预实验结果表明，Wip1参与了视网膜前膜和视神经损伤后星形胶质细胞活化，并能够调控Mdm2表达。基于此，我们提出假说：Wip1能够门控调节p53-Mdm2信号环路，进而影响星形胶质细胞炎性活化和RGCs凋亡。课题组拟首先明确Wip1、p53以及Mdm2均参与了星形胶质细胞炎性活化过程。在此基础上，进一步分析Wip1对Mdm2磷酸化、泛素化和分子稳定性影响；同时检测p53及其下游分子表达，明确Wip1对p53-Mdm2信号环路的门控调节作用。最后，通过靶向干预Wip1调节p53-Mdm2信号环路，明确其对星形胶质细胞炎性活化和RGCs凋亡影响。课题研究结果将为视网膜退行性疾病的治疗提供新的理论依据和分子靶点。

包括青光眼、视网膜脱离在内的眼底视网膜疾病是眼科的难治性疾病，可造成严重的视功能损害。这其中，胶质细胞的炎性活化和视网膜下积液是导致病理损伤持续的重要原因。因此，开展相关的分子调控机制和治疗策略的研究显得尤为重要。项目组首先检测视神经损伤（ONC）动物模型视网膜上P53诱导的死亡域蛋白（PIDD）的表达，探讨PIDD在视神经损伤诱导的视网膜胶质细胞激活和NF-κB激活中的作用。通过ONC动物模型，我们首先明确了PIDD在视网膜中的表达（分别为Isof-1、Isof-2和Isof-3）。进而通过GFAP+胶质细胞和IBA1+小胶质细胞的表达提升，证明胶质细胞活化状态。通过对PIDD进行靶向干预，明确了PIDD在视网膜胶质细胞激活和NF-kB激活中的作用。这些结果直接证明，ONC后PIDD（Isof-1和Isof-3）在视网膜中过度表达，PIDD可能通过调节视网膜胶质细胞激活和NF-κB激活参与视网膜神经退行性疾病。此外，项目组在开展玻璃体腔注射相关实验中，发现玻璃体腔残留空气，可以有效减少小鼠视网膜脱离时间，减少视网膜下液。受此启发，课题组开发了玻璃体腔注射技术，并开展验证工作。我们以巩膜扣带术后的亚临床视网膜下液（SRF）为治疗目标开展研究。项目组研究发现，通过玻璃体腔空气注射辅助下的巩膜扣带术，可以有效的减少视网膜下积液持续时间，同时在治疗过程中未发现明显的并发症。课题组的研究成果为完善视神经损伤分子机制和治疗方案提供了新的思路。