铜绿假单孢菌QS系统和TLRS途径在生物膜免疫调节机制中的作用

铜绿假单胞菌是医院内感染的常见病原菌。在体内有人工置留物或免疫功能低下的患者中常常导致严重的感染。现代微生物学观点认为生物膜（biofilm）是铜绿假单胞菌感染的主要存在形式。群体感应系统不仅调节铜绿假单胞菌生物膜形成，而且损伤固有免疫反应，抑制T细胞的活化、增殖，影响T细胞分化。Toll样受体(Toll-like receptor)信号传导在启动机体的固有免疫反应，T细胞的活化、增殖、分化中起到重要的作用。本项目通过实时定量 PCR、流式细胞术、以及免疫组化等技术，试图证实群体感应系统可能通过影响TLR受体、TLR传导途径相关分子、负性调节因子，以及这一过程中所涉及的NF-κB通路，发挥作用，这可能是生物膜对固有免疫和获得性免疫耐受的重要机制之一。开展此项研究有望为研制通过干预细菌的群体感应系统,从而大大降低细菌危害的新型的抗菌制剂提供新靶位。

生物膜是细菌感染的主要存在形式，而群体感应（quorum-sensing）系统是铜绿假单胞菌生物膜耐药和逃逸免疫系统主要原因之一。Toll样受体(Toll-like receptor)信号传导在启动机体的固有免疫反应，T细胞的活化、增殖、分化中起到重要的作用。本研究通过体外和体内实验观察氨溴索对粘液型铜绿假单胞菌BF干预作用。结果发现（1）3- O- C12-HSL刺激单核细胞12h后，单核细胞的活力降低TLR2／4 mRNA表达降低，TLR5mRNA表达增高，且呈剂量依赖关系;TLR2／4蛋白表达降低，TLR5但蛋白表达无增高。 (2) 3- O- C12-HSL可以激发淋巴细胞细胞增殖，上调Toll样受体的表达水平(3) 抑制单个核细胞分泌TNF-α，IL-12且呈剂量依赖关系(4) 氨溴索联合环丙沙星雾化可破坏大鼠气管导管上的生物膜，减轻肺部免疫损伤。(5)大鼠气管导管上的△lasR△rhlR生物膜可诱导更高的TLR5反应，导致更轻的肺部炎症反应。