高灵敏DNA损伤检测装置研制与体内痕量DNA加合物的检测

多种典型的环境污染物可引起生物体内遗传物质DNA的损伤，从而导致基因突变、致畸和致癌等遗传毒性。一个关键的问题是如何发展高灵敏、安全、易于应用的可检测人体内痕量DNA损伤（主要为加合物）的新技术新方法，以满足我国环境污染与健康效应研究的迫切需要。当前人体内痕量DNA加合物的检测主要依赖于繁琐、带有放射性的32P后标记法。本申请项目提出研制新型、高灵敏的DNA损伤检测装置，发展安全无放射性、高灵敏的DNA损伤检测方法。申请研制的装置集成了毛细管电泳的高效分离、激光诱导荧光的高灵敏检测和荧光偏振等先进技术，并采用先进的光路设计和鞘流池接口技术。预期可采用比32P法低200倍的DNA（约50纳克）,即能检测出人体内痕量的苯并[a]芘-DNA加合物。同时，拟研制的装置可应用于多种DNA损伤分析以及DNA-蛋白质的相互作用研究，可从分子水平上阐明DNA的损伤、修复、突变等毒理作用机制和健康效应。