应用mRNA差异显示(DD-RTPCR)、抑制性差减杂交(SSH)、蛋白质双向电泳(2D-PAGE)与质谱分析等分子生物学技术研究双孢蘑菇分解基质能力退化菌株及其出发菌株的蛋白质、mRNA表达的差异,分离3-5个差异蛋白质和差异DNA片段,进行序列分析与比较、验证等,进一步通过基因组文库、cDNA文库筛选或快速扩增cDNA末端(RACE)技术克隆1-2个相关全长基因或全长cDNA,比较正常与变异基因序列差异,并通过基因转化、RNA干扰(RNAi)等技术进行基因功能分析与鉴定,确定与双孢蘑菇分解基质能力退化性状相关的基因与蛋白质(酶),阐明双孢蘑菇分解基质能力退化的分子机理。这对于丰富双孢蘑菇育种理论,选育具有自主知识产权的优良蘑菇菌株具有重大的理论指导意义;对于建立实验室早期预测手段,减少农民的损失,保证我国的优势产业继续跻身于世界前列具有重大的实际应用价值。
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数据更新时间:2023-05-31
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