活性VD3、组合型植酸酶及其互作对钙和磷利用效率影响的机理研究

本项目针对影响畜禽钙和磷利用效率的"消化"和"吸收"问题。首先，通过比较研究不同来源植酸酶蛋白结构、酶学特性、水解特性、对采食"玉米－杂粕"日粮黄羽肉鸡生长性能影响等，利用不同来源植酸酶之间的差异互补性、有效组合发挥协同增效作用，设计并筛选出最佳高效组合型植酸酶；然后，研究活性VD3、25-OH-VD3和1,25-(OH)2-D3对黄羽肉鸡生长性能、钙和磷真代谢率、血液和组织中活性VD3含量、钙结合蛋白和磷转运载体mRNA及蛋白表达的影响，阐明活性VD3提高钙和磷吸收效率的机理；最后，从生长性能、钙和磷真代谢率、血液中钙和磷含量、血液中活性VD3及激素水平、钙结合蛋白和磷转运载体的mRNA及蛋白表达等方面，系统研究组合型植酸酶与活性VD3之间互作效应及其作用机理。结果为高效利用饲料中钙和磷提供理论基础和实践指导。

项目开展了3个部分研究：（1）研究了4种来源植酸酶酶学性质的差异性与互补性，按1:9、2:8、3:7、4:6、5:5、6:4、7:3、8:2和9:1的比例进行组合，通过分析不同组合对植酸钠和玉米-豆粕日粮中磷或钙代谢率影响，筛选出酶B+D 5:5、7:3二个较优组合；设计酶B+D 5:5、7:3个正效应组合和3:7一个负效应组合，研究组合相对单酶及空白对照组对肉鸡生长性能、胫骨品质及钙和磷沉积的影响，结果发现组合酶（酶B：D=5:5或7:3）对肉鸡的采食量、日增重、胫骨钙含量、胫骨磷含量的改善效果优于添加单酶组（酶B和酶D）。（2）以普通VD3为对照，研究25-OH-D3和1ɑ-OH-D3对黄羽肉鸡生长性能、机体生化指标、骨骼发育及养分利用率等影响。结果发现：90μg/kg 25-OH-D3（0.7% Ca、0.45% P）日粮设计可获得最佳生长性能；以25-OH-D3为VD3供给形式下，适宜添加量为90μg/kg；以1ɑ-OH-D3为VD3供给形式下，适宜添加剂量为10μg/kg。25-OH-D3和1α-OH-D3对VD3具有不同程度的积极替代效应。（3）设计25-OH-D3、植酸酶和NPP三因素、（34.5、69μg/kg）、（300、600U/k）、（0.2、0.3%）两水平的L8（27）正交试验，研究25-OH-D3、植酸酶和NPP交互作用对肉鸡生产性能、骨骼发育、钙和磷利用率及磷转运载体基因 mRNA表达的影响。结果发现：NPP与植酸酶对肉小鸡日增重和采食量有显著互作效应；植酸酶与25-OH-D3，NPP与植酸酶，NPP、25-OH-D3与植酸酶对胫骨发育的影响存在交互作用；植酸酶、25-OH-D3和NPP对肉鸡血清钙、磷和AKP含量、胫骨灰分、钙和磷的利用率以及肉品质表观性状无明显的交互作用；21d肉鸡十二指肠 NaPi-Ⅱb mRNA 相对表达量显著高于空肠、空肠表达量显著高于回肠，低磷饲粮可以提高21d 肉鸡十二指肠、空肠和回肠NaPi-Ⅱb mRNA 表达量。.项目初步建立了组合植酸酶设计的理论和实践技术基础，筛选出了2个较优组合，探讨了不同VD3对黄羽肉鸡生长、钙和磷利用效率影响及其机理，阐明了日粮钙和磷水平、植酸酶与VD3互作效应及其作用机理。发表论文8篇、其中SCI收录论文2篇，出版专著1部、编著2部，培养博士研究生1名、硕士研究生3名。