人胎肝造血干细胞增殖刺激物及其受体的分子生物学研究

经超滤、DEAE-Sephacel、Sephacryl S-200和Superose 12HR分离纯化，从人胎肝细胞原代培养上清中分离到—35KD的单—活性成分。它与具有这类活性的IL-3，IL-6，GM-CSF，FLT3配基和SCF等在理化特性或生物学性质上均有所差异，在胎肝造血活跃时期是启动早期造血干细胞从GO期进入S期的主要活性物质。从人胎肝中提取mRNA，克隆人TPO cDNA编码区；进而实现了在原核系统、COS7细胞与CHO细胞的稳定表达，其中在原核系统大肠肝菌中的表达水平达可溶性菌体总蛋白的45%；表达产物具有明显的刺激血小板生成的作用。此外，从人胎肝中克隆人MSP cDNA编码区；实现了在COS7细胞中的瞬时表达；发现MSP具有类似HGF刺激造血干/祖细胞增殖的作用。通过分析人IL-9、IL-2、IL-5、EPO、IL-4、猪GM-CSF与人IL-8受体、小鼠EPO受体、牛IL-2受体、人GM-CSF受体和IL-9受体等的纵横向进化，发现物种演化中蛋白质编码序列存在普遍的随机化现象。