中介素对高密度脂蛋白的作用及机制研究

Dyslipidemia is the pathogenic risk factor of atherosclerosis (AS). Statins，the main role of which is to inhibit the hydroxy methyl glutaryl coenzyme A(HMG-CoA),are generally used to regulate blood lipids in AS patients chiefly by lowering low density lipoprotein cholesterol (LDL-C). However, the risk of cardiovascular events remains in patients with statin therapy.On the other hand, high density lipoprotein cholesterol (HDL-C) plays an important role in preventing athrosclerotic disease. Our previous research shows that intermedin (IMD) can lower LDL-C, raise HDL-C and decrease atheromatous plaque. In addition, the endogenic expression of IMD increases in hyperlipemic rats. In this study, we are going to explore the effect of IMD on level, subclass，component and function of HDL combined with statins in vivo and in vitro. Meanwhile, we will test cholesterol ester transfer protein(CETP) and lecithin-cholesterol acyltransferase(LCAT) to investigate the possible regulatory mechanism of IMD. Furthermore, we are planning to analyse the relationship among IMD gene rs3840963 polymorphism, HDL subclass and AS. In order to establish the further effect of lipoprotein metabolism on the development of AS, this research will give us a more comprehensive understanding of IMD and its profound effects. Finally, we are aiming at developing a new anti-atherosclerotic drug to raise HDL in line with physical characteristics, thus providing new insights into athrosclerotic protection.

血脂异常是动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）的致病性危险因素。羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂（他汀）降低低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）,但经其治疗仍存在心血管事件风险。高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）是AS发生的保护因素。我们前期研究发现中介素（IMD）能降低LDL-C、升高HDL-C、减少粥样斑块；而高脂血症大鼠内源性IMD表达升高。本项目拟通过动物和细胞实验观察IMD在他汀基础上对HDL的水平、亚型、成分及抗氧化等功能的影响并检测胆固醇酯转移蛋白（CETP）、胆固醇酰基转移酶（LCAT）等探索可能的调控机制。此外，在AS人群中分析IMD基因rs3840963多态性与HDL及AS的相关性。该研究将有助于更加全面地了解IMD的作用，进一步阐明高密度脂蛋白代谢在AS发生发展中的作用，为研发具有升高生理活性的HDL的抗AS药物提供新思路。

血脂异常是动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）的致病性危险因素。羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂（他汀）降低低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）,但其经治疗仍存在残余心血管风险。高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）是AS发生的保护因素。我们前期研究发现中介素（IMD）能降低LDL-C、升高HDL-C、减少粥样斑块；而高脂血症大鼠内源性IMD表达升高。本研究通过动物模型以及细胞实验，进一步验证IMD能够降低LDL，升高HDL，特别是具有抗AS的活性HDL-C，从而发挥抗AS作用。同时，对IMD升高HDL的机制进行探讨，从胆固醇逆转运（RCT）角度出发，证实IMD可能通过上调巨噬细胞表面腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗体（ABCA1）基因以及蛋白的表达，促进载脂蛋白A1（APOA1）介导的胆固醇流出，促进RCT，发挥抗AS作用，并分别对人体细胞以及动物细胞的进行对比，证明IMD对AS具有保护作用。同时高胆固醇可以通过降低氧化应激反应上调小鼠主动脉中介素及其受体，我们采用7周大雄性Wistar大鼠，分为对照组、高胆固醇饮食喂养组、辛伐他汀组和维生素C组。高胆固醇饮食组的小鼠主动脉氧化应激指标MDA、SOD、IMD及其受体水平均升高，而在辛伐他汀组和维生素C组中IMD及其受体均低于高胆固醇饮食组。同时发现IMD具有减轻人源氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）对内皮的损伤作用，IMD下调人脐静脉内皮细胞（HUVEc）摄取ox-LDL过程中活性氧（ROS）、白介素-6（IL-6）及肿瘤坏死因子（TNF-α）的蛋白水平及mRNA水平的表达，且此过程可被蛋白激酶 A抑制剂（PKAI）抑制，IMD可能通过蛋白激酶 A（PKA）信号途径抗氧化应激及炎症反应发挥抗AS作用。本研究从全新的角度探索IMD抗AS的机制，有助于更加全面地了解IMD与高密度脂蛋白代谢在AS发生发展中的作用，为研发具有抗AS的活性HDL相关药物提供新思路。