甘薯抗茎线虫病相关基因的克隆与功能分析

甘薯茎线虫病是甘薯的严重病害，对我国甘薯生产已构成严重威胁。甘薯受茎线虫病危害，造成薯块糠心，导致甘薯品质和产量严重下降。本研究以甘薯高抗茎线虫病品种鲁薯3号为材料，利用抑制差减杂交技术，构建茎线虫诱导的差异表达cDNA文库，Blast2Go比对差异表达EST，并进行GO功能分类及KEGG代谢途径搜索，筛选与抗茎线虫病相关的EST；根据抗茎线虫病相关EST的序列设计引物，对茎线虫侵染后不同时间的块根总RNA分别进行实时荧光定量PCR，明确甘薯受茎线虫侵染后相关EST表达情况；根据抗茎线虫病相关EST的序列设计引物，用RACE方法扩增，获得全长cDNA；用农杆菌介导法将克隆的基因导入感茎线虫病甘薯品种中，获得转基因植株，对其进行茎线虫病抗性鉴定，以分析所克隆基因的功能。本研究的成功，将为甘薯抗茎线虫病基因工程奠定基础，对甘薯抗茎线虫病育种具有重要的理论意义和应用前景。