Wnt/β-catenin信号通路在а-硫辛酸改善Aβ神经毒性作用中的基础研究

Wnt/β-catenin信号转导通路是调控细胞增长、发育和分化的重要途径，近年来研究发现，这一信号转导通路在阿尔茨海默病（AD）的发病中起着重要作用，可能是联系神经纤维改变与淀粉样斑块发生的核心通路之一。作为一种类维生素物质，α－硫辛酸（LA）的神经保护功能逐渐受到重视，目前在AD的防治中取得一定进展，但机制仍未完全明了。如是否对胶质细胞有保护作用？机制如何？Wnt/β-catenin通路和LA都作为氧化应激的保护反应，那么两者之间是否存在关联？LA的神经保护作用是否是通过增强Wnt/β-catenin通路来实现？这些均未见报道。本研究以β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的原代神经元细胞和小鼠胶质细胞系N9为模型，研究了Aβ对神经元和胶质细胞内Wnt通路的影响，以及Wnt通路对LA神经保护作用的影响，进一步探讨了LA的作用机制，为LA在AD领域的广泛应用提供理论基础，同时为AD的防治提供新的思路。

随着人口老龄化的发展，阿尔茨海默病（AD）逐渐成为威胁老年人健康的主要疾病，由于其病程漫长，一旦患病会给个人、家庭和社会带来沉重的精神和经济负担。AD作为一种慢性致死性疾病，其发病机理十分复杂，确切病因尚未明了，因此，探讨各种干预手段早期预防AD的发生，对于提高老年人的生活质量以及实现健康老龄化均具有重要的科学、经济和社会意义。. α－硫辛酸（LA），是一种在菠菜、酵母和肉类中发现的生物因子，是已知的唯一即可在水相又可在脂相中溶解的抗氧化剂，作为迄今为止最强的抗氧化小分子化学物质，近年来，LA在AD治疗中的作用逐渐得到人们的重视。Wnt/β-catenin信号转导通路是调控细胞增长、发育和分化的重要途径，越来越多的研究表明这一信号转导通路在AD发病过程中起着重要的作用。为了解Wnt通路在LA改善β淀粉样蛋白（Aβ）引起的神经毒性中的作用，本研究以Aβ25-35诱导PC12细胞建立模型，LA进行干预后对细胞活性、细胞凋亡、细胞氧化应激水平、相关基因及蛋白的表达水平及蛋白的亚细胞定位等进行检测，结果表明Aβ25-35作用于PC12细胞，可引起细胞活性的明显降低，凋亡率升高，抗氧化酶活性降低，活性氧水平升高，凋亡相关基因表达水平改变，Wnt通路关键蛋白 Frizzled2、GSK3β、p-GSK3β 等的表达也出现了一定的改变，此外AD特异性蛋白的表达也受到影响，而LA干预后，Aβ25-35诱导所引起的异常表达指标有了不同程度的改变，表明LA对神经细胞有明显的保护作用，Wnt/β-catenin信号转导通路是Aβ25-35介导的神经毒性及LA的神经保护的重要机制之一。. 为了解Wnt/β-catenin信号转导通路在LA改善Aβ引起的小胶质细胞毒性中的作用，以Aβ25-35诱导BV2细胞建立模型，LA进行干预后对细胞活性、炎症反应、氧化应激水平、相关蛋白的表达水平及蛋白的亚细胞定位等进行检测，结果发现，Aβ25-35作用后，小胶质细胞被激活，炎性细胞因子的表达升高，氧化应激水平改变，细胞凋亡率升高，Wnt通路关键蛋白的表达受到影响，LA干预后这些异常表达指标受到抑制。综上表明Wnt/β-catenin通路是Aβ25-35引起小胶质细胞毒性的重要途径之一，激活Wnt/β-catenin可能是LA的作用机制之一。本研究为LA的应用提供了理论基础，也为AD的防治提供了新的思路