FFA通过PGC-1α调节VSMCs的增殖与迁移参与动脉粥样硬化发病的体内研究

体外实验证实PGC-1α是自由脂肪酸（FFA）调控血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖和迁移的关键因子，而油酸（OA）和棕榈酸（PA）对VSMC中PGC-1α的调控作用完全相反。本项目拟结合临床标本研究和动物模型实验，研究血液中PA/OA比值与血管平滑肌中PGC-1α表达量的关系，以及PA/OA比值的改变对于动脉粥样硬化发生和发展的影响。（1）应用气相色谱法检测动脉粥样硬化患者血液PA/OA比值，结合临床资料，研究在体内PA/OA的比值是否与动脉粥样硬化发病的风险相关。（2）采用实时定量PCR和Western blot方法检测动脉粥样硬化患者主动脉壁PGC-1α的表达量，与血液中PA/OA比值比较，研究其有无相关性。（3）建立动脉粥样硬化动物模型，结合局部腺病毒感染的方法，通过高脂食物喂养，改变脂肪酸比例，研究血管平滑肌中PGC-1α表达，以及PA/OA比例的改变对于动脉粥样硬化发病的影响。

血管平滑肌细胞（VSMCs）参与的血管保护机制的破坏是动脉粥样硬化（AS）发生过程中的重要的一环。我们前期研究表明，PGC-1α是自由脂肪酸（FFA）调控VSMCs增殖和迁移的关键因子，而油酸（OA）和棕榈酸（PA）对VSMCs中PGC-1α的调控作用完全相反。在本项目中，我们围绕PGC-1α和VSMCs进行了一系列研究，从分子机制上更进一步阐述了PGC-1α可以通过保护血管内皮细胞（ECs）和抑制VSMCs增殖与迁移抑制AS的形成、进展。首先，我们应用气相色谱法检测动脉粥样硬化患者血液 PA/OA 比值，结合患者临床资料，研究在体内 PA/OA 的比值是否与动脉粥样硬化发病的风险相关。其次，我们在分子机制上阐明miR-221/222可以在ECs中通过下调PGC-1α的表达，从而导致血管内皮细胞内ROS积聚增多，进一步造成血管内皮损伤。最后，我们利用SM-22作为启动子，设计制作了血管平滑肌特异性PGC-1α转基因实验兔，为后续试验做动物模型。我们调整了原来的项目规划，通过目前实施的这一系列研究，从分子-动物模型-临床角度，更进一步的阐明了PGC-1α可以保护血管防止AS的形成和进展。为后续分子实验和临床应用奠定了基础。