核因子κB介导醛固酮通过NHE1所致肾小球硬化的研究

醛固酮在脏器纤维化过程中起着重要的作用, 钠－氢交换子1（NHE1）也和脏器纤维化关系密切, 本课题组的前期研究初步证明了醛固酮所致的肾小球纤维化系通过介导NHE1表达和活性增加所致。而核因子κB（NFκB） 作为一种介导细胞内信号转导的重要转录因子,可能参与肾小球肾炎以及醛固酮介导的炎症和脏器纤维化发生发展过程。本研究分别从整体动物水平，组织水平和细胞水平探讨醛固酮是否是通过激活NHE1－NFκB途径参与慢性肾小球硬化的发生发展？抑制NHE1表达以及抑制NFκB活性是否可通过改善肾脏的炎症状态、氧化应激状态和抑制细胞外基质合成的途径缓解肾脏纤维化的进程？本研究的意义在于通过研究核因子κB介导醛固酮通过NHE1所致肾小球硬化的机理，探索慢性肾脏病变的病理生理机制，为慢性肾脏疾病的临床诊断和治疗提供新的思路。

本课题旨在探讨NFκB在醛固酮导致肾损伤中的作用，通过建立醛固酮-高盐肾损伤模型观察NFκB的活化是否参与了醛固酮导致的肾损伤及其相关机制。另外有研究发现内质网应激与神经细胞的凋亡损伤密切相关，多种因素均能够引起内质网应激，其中活性氧作为信号分子，不仅能够诱导内质网应激，其也能够介导凋亡的发生，并且在多种肾脏疾病的发病机制中起着重要作用。鉴于内质网应激在肾脏损伤发病机制中的作用和氧化应激参与了醛固酮诱导的肾损伤模型，本研究还探讨了氧化应激和内质网应激在醛固酮致肾小管上皮细胞凋亡中的相互作用。体内动物实验采用32 只雄性SD 大鼠单侧肾脏切除后1 周后随机均分为4 组:对照组；高盐组（1%高盐饮食）；醛固酮组（1%高盐饮食-0.75ug/h 醛固酮泵入）；PDTC 组（1%高盐饮食-0.75ug/h 醛固酮泵入-PDTC100mg/kg 灌胃），共治疗4 周。体外细胞实验采用体外培养人肾小管上皮细胞，细胞同步化后给予不同浓度醛固酮刺激，根据不同分组加入NAC（5 mM）和空载，Western blot 法检测GRP78 和CHOP 表达水平。研究结果提示NF-κB 的活化参与了醛固酮导致的肾损伤；NF-κB 通过调节CTGF、ICAM-1、TGF-β、collagen Ⅳ的表达参与了醛固酮导致的肾损伤；醛固酮能够分别诱导肾小管上皮细胞发生氧化应激和内质网应激，ROS 介导的，CHOP 转录因子依赖的内质网应激通路在醛固酮致肾小管上皮细胞凋亡中起着重要作用。本研究为慢性肾脏病的研究和防治提供新的理论依据和靶点。