红曲米非他汀类物质降胆固醇机理的研究

Hypercholesterolemia is an important risk factor of individuals developing atherosclerosis, coronary heart disease, and other cardiovascular diseases. Lovastatin is a cholesterol-lowering drug capable of reducing cholesterol by inhibiting the activity of HMG-CoA（HMGCR）reductase enzyme, which limits the endogenous cholesterol synthesis in body. Red Yeast Rice (RYR) is of superior efficacy and safety on cholesterol-lowering to lovastatin. Besides lovastatin, there are other bioactive constituents in RYR responsible for the cholesterol-lowering activity, but the mechanisms are unknown. Our objective is to study the cholesterol-lowering mechanisms of non-monacolins in RYR. The RYR candidates are screened by investigating the serum cholesterol level, the transcriptional levels of HMGCR, and SREBP-2 in the hamsters having high cholesterol when fed either with RYR or lovastatin as reference. The endogenous Monacolins in RYR is separated into monacolins-free and monacolins-rich groups in order to confirm the cholesterol-lowering efficacy of RYR excluding monacolins. In terms of the cholesterol production and delivery, the reverse cholesterol transport and bile acid secretion in maintaining cholesterol homeostasis, the mechanisms of cholesterol-lowering RYR excluding Monacolins are elucidated at the cellular and molecular levels. The results will initially clarify the cholesterol-lowering mechanisms of non-monacolins in RYR, which will offer theoretical basis in searching new cholesterol-lowering factor(s) in RYR.

高胆固醇血症是动脉粥样硬化，冠心病及其他心血管疾病的重要危险因素。洛伐他汀通过抑制胆固醇合成限速酶HMGCR活性，降低人体内源性胆固醇合成，达到降胆固醇功效。红曲米降胆固醇的有效性和安全性高于洛伐他汀。除了含有洛伐他汀，红曲米中存在其它降胆固醇的活性成分，机理待阐明。本项目将开展红曲米非他汀类物质降胆固醇机理的研究:以洛伐他汀为参比，通过对高胆固醇血症仓鼠饲喂红曲米，监测血脂、HMGCR、固醇结合蛋白SREBP-2转录表达水平的方法，筛选获得非他汀类物质降胆固醇红曲米；将含他汀物质的红曲米分成富含和不含他汀物质的组分，进一步明确非他汀类物质降胆固醇的功效；从维持机体内胆固醇稳态的胆固醇合成传递、反向转运和清除排泄三大方面，解析红曲米非他汀类物质在细胞代谢和分子调控水平对胆固醇代谢的影响机制。本项目的成果将初步阐明红曲米非他汀类物质降胆固醇机理，为发掘降胆固醇红曲新功能因子提供理论支撑。

红曲米是一种功能性发酵食品，洛伐他汀是红曲米中主要功能成分之一，它通过抑制内源性胆固醇合成限速酶-HMG-CoA还原酶的作用达到降低胆固醇的效果。文献报道高胆固醇血症受试人群服用仅含5-7.5 mg洛伐他汀的红曲米与20mg洛伐他汀用药组具有相当的疗效。因此，我们推测红曲米基质中除了洛伐他汀还存在其他的降低胆固醇的功能因子。我们的目标是寻找新的降低胆固醇的生物活性因子，解析非他汀类物质降血脂的机制。.通过高效液相-质谱联用分析方法对候选的红曲米进行他汀和色素指纹图谱分析。红曲霉C2发酵红曲米被筛选为高胆固醇饲喂造模仓鼠的降血脂功效评价的原料。检测了C2发酵红曲米对高胆固醇饲喂造模仓鼠血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的影响；比较了分别灌胃红曲C2发酵物和洛伐他汀对高胆固醇饲喂仓鼠肝组织中的HMGCR, SREBP-2, LDLR, LXR- and CYP7A1转录表达的影响；同时观察了肝组织切片的变化。采用高速逆流色谱技术将含他汀物质的红曲米分成富含和不含他汀物质的组分（MKF），进一步明确非他汀类物质降胆固醇的功效。结果显示C2发酵红曲米有效降低了高胆固醇仓鼠血清和肝组织中的胆固醇，胆固醇转化为胆汁酸过程中重要的因子CYP7A1的转录表达水平上调。低剂量的MKF虽然使CYP7A1在转录水平下调，但其蛋白表达水平上调。上述结果提示MKF降血脂机理之一是通过上调CYP7A1的表达促进胆固醇的外排。.通过制备液相分离技术从高色价红曲米中成功分离纯化了12种化合物，经高脂仓鼠筛选，发现MX有显著降低血清甘油三酯效果，其病理切片显示MX有效抑制肝细胞脂质浸润，但血清中的LDLC维持在较高水平。血清中高水平的LDLC可能是外周组织或器官胆固醇流出的增加所致。有待于通过MX多个梯度水平给药，调查其对非肝组织中胆固醇代谢的影响来进一步验证。. 以上结果初步阐明红曲米中存在非他汀类降血脂功能因子。这为深入发掘红曲降胆固醇新功能因子提供了理论依据。.