基于动脉粥样硬化演变过程的uPAR靶向MR成像研究

巨噬细胞贯穿于动脉粥样硬化（AS）发生与发展的全过程，决定着斑块的易损性。对巨噬细胞的靶向分子成像研究是动脉粥样硬化早期防治的关键。尿激酶纤溶酶原激活物（uPA）及其受体，在AS的动脉壁中特别是巨噬细胞上特异性高表达，成为新的研究靶点。本研究通过PCR和荧光光谱法制备以巨噬细胞表面uPAR为靶点的磁共振-荧光双标探针（Cy5.5-ATF-IO），通过体外巨噬细胞成像和动脉内膜拉伤、间断高脂饲养制造的动脉粥样硬化兔模型，以及药物激发方法诱发易损斑块产生（斑块破裂和血栓形成），进行观察，明确分子探针的组织分布、信号特点；比较疾病不同的阶段的成像特点；探讨以uPAR为靶点的动脉粥样硬化疾病分子成像的价值；阐明巨噬细胞在疾病发生、发展中的变化规律及其作用机理。

摘要.巨噬细胞贯穿于动脉粥样硬化（AS）发生与发展的全过程，决定着斑块的易损性。对巨噬细胞的靶向分子成像研究是动脉粥样硬化早期防治的关键。尿激酶纤溶酶原激活物（uPA）及其受体，在AS的动脉壁中特别是巨噬细胞上特异性高表达，成为新的研究靶点。本研究通过分步骤进行了如下研究：1. 采用3.0T MRI动态观察兔腹主动脉粥样硬化斑块演变过程，验证了兔动脉粥样硬化模型的可靠性和MRI观测斑块的准确性。2.研制以uPAR为靶点的磁共振-荧光双标探针（Cy5.5-ATF-IO），在动脉内膜拉伤、间断高脂饲养制造的动脉粥样硬化兔模型，验证靶向uPAR的分子探针具有较高的靶向性。3. 通过与病理组织切片对照研究验，验证了uPAR在各组织脏器，动脉粥样硬化斑块各组织成分中的分布及其在动脉粥样硬化演变中的作用机制。结果表明靶向uPAR的分子探针在脾脏内明显染色，在动脉粥样硬化斑块内聚集，导致斑块信号减低，组织病理上显示靶向探针主要在内膜下断裂的平滑肌细胞和钙化区域周围显像，巨噬细胞周围靶向铁磁颗粒的聚集不明显。提示除巨噬细胞外，平滑肌细胞凋亡和钙库操纵性钙通道蛋白可能也参与斑块的发生和发展过程。4. 采用蛇毒诱发建立易损斑块模型，通过病理对照，验证了易损斑块模型的具有较高的成功率以及降脂药物在稳定兔动脉粥样硬化斑块和降低血栓事件中起着重要的作用。发表核心期刊论文3篇，课题组1人获得北京市卫生系统高层次人才（学科带头人）资助，1人前往美国进行为期1年的进修学习。