四跨膜蛋白CD151与Co-029对TNFα/TNFαR1系统介导的肝细胞癌侵袭与转移的调控研究

近年，炎性细胞因子(TNFα等)诱导的肿瘤(包括肝癌)侵袭转移受到极大关注。我们前期证实：四跨膜蛋白CD151过表达促进肝癌转移复发，其可与其他四跨膜蛋白、c-Met及整合素等形成四跨膜网络，并通过上调后两者信号促进肝癌转移与复发(Hepatology，2009；2010；Gastroenterology，2011)；我们近期通过免疫共沉淀联合质谱分析首次发现在肝癌细胞中TNFαR1也是四跨膜网络成员之一，且下调CD151/Co-029可明显抑制TNFα诱导的肝癌侵袭转移。结合文献报道血清中TNFα水平升高与肝癌复发相关。本项目拟：①通过免疫共沉淀等研究TNFαR1与CD151/Co-029的关系，在功能上明确后两者对TNFα/TNFαR1系统的影响；②应用基因转染与干扰，调节CD151/Co-029表达，阐述其在TNFα/TNFαR1系统中的作用及分子机制；③最后通过体内动物实验证实之。

近年，炎性细胞因子(TNFα等)诱导的肿瘤(包括肝癌)侵袭转移受到极大关注。我们前期证实：四跨膜蛋白CD151是影响肝癌侵袭和转移的关键分子，其通过四跨膜网络影响细胞表面多种跨膜蛋白功能，包括整合素及生长因子受体等。本课题在前期工作基础上，证实：（1）通过免疫共沉淀结合质谱分析证实四跨膜蛋白Co-029及肿瘤坏死因子受体1(TNFαR1)是CD151的相互作用蛋白，并通过沉淀后western blot证实。 （2）通过干扰四跨膜蛋白CD151，分析应用Co-029抗体不能沉淀TNFαR1，干扰Co-029表达，发现CD151抗体不能沉淀TNFαR1。干扰CD151与Co-029后，TNFα诱导肿瘤细胞侵袭与转移作用明显下调；细胞形态及TNFα诱导的细胞上皮-间质转化延迟；（3）动物实验也证实干扰CD151与Co-029后，TNFα诱导的肝癌肺转移下调。（4）临床上Co-029，CD151与TNFαR1共同表达患者预后较单独表达者差。（5）成功合成靶向CD151/整合素α6β1四跨膜蛋白复合体的小鼠单克隆抗体，该抗体能显著抑制肝癌细胞的侵袭、新生血管形成和转移，并延迟TNFα诱导的肝癌肺转移。本研究进一步阐述CD151参与的四跨膜网络，为CD151作为肝癌侵袭转移的治疗靶点提供新的理论依据。