Wnt16信号通路在小鼠腭发育及腭裂形成中的作用机制研究

腭裂是最常见颌面部先天性畸形之一，其病因和发病机制尚不清楚。我们在研究腭裂患儿腭成纤维细胞表型中通过基因芯片技术分析发现WNT16过度表达，而该蛋白在鼠胚腭发育关键时期中正常表达于腭间充质，提示Wnt16及其信号通路可能与腭发育以及腭裂的发生密切相关。为了揭示Wnt16信号通路与腭发育的相关性，我们构建Wnt16腺病毒载体和靶向Wnt16 shRNA，转染鼠胚腭间充质细胞，结合相应通路分子的抑制剂或激活剂，确定Wnt16在该细胞的信号通路；通过羊膜腔内基因转染，观察Wnt16腺病毒载体和/或其通路抑制剂作用下，对鼠胚腭发育的影响；体外腭板培养，研究Wnt16信号通路与其他腭发育相关重要信号分子的相互作用。本研究有助于深入认识Wnt16信号通路对腭发育的作用，可能对于腭裂的发生产生新的认识。

腭裂是最常见颌面部先天性畸形之一，其病因和发病机制尚不清楚。我们在研究腭裂患儿腭成纤维细胞表型中通过基因芯片技术分析发现WNT16过度表达，而该蛋白在鼠胚腭发育关键时期中正常表达于腭间充质，提示Wnt16及其信号通路可能与腭发育以及腭裂的发生密切相关。为了揭示Wnt16信号通路与腭发育的相关性，我们构建了Wnt16腺病毒载体和Wnt16 siRNA，体外转染鼠胚腭间充质细胞和腭板，研究结果表明，Wnt16通过经典的Wnt信号通路促进细胞增殖，Wnt16过表达腭板不融合。这部分内容数据尚在整理中。. 我们的前期研究表明Wnt16在鼠胚头部的表达主要位于头顶骨，鼻中隔，上下颌骨以及腭骨的类骨质，且与成骨标志物（碱性磷酸酶，骨钙蛋白以及钙盐）在鼠胚头部的表达位置一致，提示Wnt16在膜内成骨中发挥作用。为了证明这一点，我们将Wnt16过表达载体转染小鼠头顶骨前成骨细胞MC3T3-E1，研究Wnt16对前成骨细胞增殖和分化的作用。研究结果表明：Wnt16不影响成骨细胞增殖，通过Wnt经典信号通路抑制成骨细胞分化。这部分内容已投Journal of cellular physiology杂志，现已发表。. LiCl可用于治疗狂郁症及白细胞减少症。作为GSK3β抑制剂，LiCl是否会影响腭板的融合以及腭间充质成骨分化。我们将LiCl加入体外培养的腭板，研究结果表明：LiCl下调Wnt16表达，抑制腭板融合以及腭板成骨分化，可能通过经典的Wnt信号通路发挥作用。这部分数据已投递。