果胶多糖的可控性降解及其活性寡糖片段的序列结构研究

果胶是一类结构复杂的酸性杂多糖，是植物细胞壁的主要成分之一，分布广泛，在食品工业中被用作增稠剂、胶凝剂和稳定剂等。果胶多糖降解产生的果胶寡糖，是重要的生物信息分子，具有独特的生物活性，是植物诱抗剂并有潜在的新药开发价值，已引起研究者的广泛兴趣。现有的果胶寡糖活性研究大都以降解后的果胶寡糖混合物为材料进行，由于降解方法可控性差，寡糖片段的聚合度难以控制，加之分离纯化和分析检测的困难，果胶寡糖序列结构尚不清楚，因而难以阐明其构效关系和作用机制。本项目拟通过优选特定的果胶降解酶及降解条件，建立果胶多糖的可控性降解方法及果胶寡糖的分离制备及分析测定方法，利用衍生化HPLC、LC-MS、MALDI-TOF-MS等技术对纯化的系列寡糖进行序列结构测定，探讨其构效关系，为从分子和基因水平上阐明其作用机制，为果胶寡糖的应用提供实验及理论依据。

果胶是一类结构复杂的酸性杂多糖，在食品工业中被用作增稠剂、胶凝剂和稳定剂等。果胶多糖降解产生的果胶寡糖，是重要的生物信息分子，现有的果胶寡糖活性研究大都以降解后的果胶寡糖混合物为材料进行。通过该课题的实施，以陕西礼泉产红富士苹果果皮为原料，优化了苹果果胶的提取方法并且以超声辅助柠檬酸提取法首次得到了富含岩藻糖的果胶多糖，测定了不同提取方法得到的果胶的理化学性质；建立了果胶多糖的酶法与化学法相结合的降解技术；建立了果胶寡糖的分离纯化及制备方法；建立了稳定同位素标记吉拉德试剂P的还原性寡糖的质谱相对定量分析方法，并将其运用于寡聚半乳糖醛酸（dp5） 的酶解条件的筛选；建立了还原性酸性糖的荧光标记方法和及其活细胞成像技术，该技术适用于寡聚半乳糖醛酸荧光探针的制备，可为果胶寡糖的构效关系研究提供帮助；对纯化后果胶寡糖的活性进行了初步研究了。本项目已发表11篇论文（其中9篇为SCI论文，2篇核心期刊论文），4篇会议论文，1篇论文正在审稿中；在该项目支持下，完成1篇博士论文，4篇硕士论文。