巨噬细胞浸润与脂肪组织血管新生异常的机制研究

血管新生与脂肪细胞增生相辅相成。脂肪组织中的缺氧现象提示组织血管分布异常或新生减少。既往的研究发现缺氧会促使脂肪组织内巨噬细胞浸润增加。我们的前期研究发现促血管生长因子- - 血小板衍生生长因子（PDGF）在肥胖小鼠的脂肪组织中表达增高，清除小鼠体内的巨噬细胞后，组织PDGF表达明显降低；同时，细胞实验证实缺氧处理的巨噬细胞表达PDGF明显增加。这提示巨噬细胞可能与肥胖小鼠脂肪组织的血管新生有关。本课题将通过原代细胞培养，细胞-组织共培养和动物实验，进一步明确巨噬细胞是脂肪组织增加的PDGF的主要来源，PDGF是否是缺氧状态下影响脂肪组织血管新生的重要细胞因子，以及探讨巨噬细胞浸润影响脂肪组织血管新生的作用机制。本研究以缺氧-巨噬细胞浸润-血管新生这个新理论为出发点，为探讨肥胖个体脂肪组织增生的病理生理机制提供新的理论依据。

背景：在脂肪细胞增生肥大发生肥胖的过程中，脂肪组织局部缺氧促使了巨噬细胞浸润及炎症因子的表达，也可能刺激了组织血管新生以缓解缺氧。本课题组前期研究发现缺氧介导巨噬细胞浸润可能参与了肥胖个体脂肪组织的异常血管新生，。.方向：1）明确巨噬细胞是肥胖小鼠脂肪组织中血小板衍生生长因子（PDGF）的主要来源细胞；2）探讨巨噬细胞浸润影响脂肪组织血管新生的作用机制； .主要内容：1）首先需要明确在缺氧或肥胖状态下，除巨噬细胞外，脂肪组织中其他细胞是否也参与了PDGF的分泌异常。其次还需要证实缺氧状态下巨噬细胞分泌的其他影响血管新生的细胞因子是否也存在异常。2）采用动物模型探讨抑制肥胖小鼠的巨噬细胞浸润可直接影响脂肪组织的血管新生这一假设。由于巨噬细胞同时具有促炎和促血管作用，从理论上而言，抑制巨噬细胞的浸润可以缓解脂肪组织的炎症反应，亦可抑制血管新生。.重要结果：1)体外缺氧细胞模型实验表明，无论是细胞株还是原代细胞，缺氧的巨噬细胞的PDGF mRNA表达均比缺氧的脂肪细胞或内皮细胞增加明显，进一步验证了巨噬细胞是局部缺氧的脂肪组织分泌PDGF的主要来源细胞。2)对缺氧的原代细胞进行不同时段的缺氧处理发现，与PDGF mRNA表达显著增加相比，巨噬细胞细胞表达的其他促血管生长因子mRNA在缺氧8小时即降低。3)在高脂饲料诱导的肥胖小鼠胃减容手术模型实验中发现，手术组小鼠脂肪组织中巨噬细胞的表达低于非手术组，且炎症性巨噬细胞亚型（M1型）的表达低于假手术组，而保护性巨噬细胞亚型（M2型）的表达明显高于假手术组。.关键数据：研究首次发现胃减容手术后肥胖小鼠脂肪组织中巨噬细胞M1型mRNA的表达显著低于非手术组，M2型mRNA的表达显著高于非手术组。在ob/ob肥胖小鼠中，PDGF 和内皮细胞标记物CD31 mRNA表达亦显著低于非手术组。.科学意义：本项目初步证实通过胃减容手术模型可减少脂肪组织的巨噬细胞浸润，尤其是炎症性M1型巨噬细胞，而保护性M2型巨噬细胞比例增多。同时，本研究发现促血管生长因子PDGF表达轻度增多，而内皮细胞标记物CD31显著增加。该结果再次验证了前期预实验关于巨噬细胞浸润及PDGF分泌异常可能参与肥胖个体脂肪组织的异常血管新生的理论假设。即巨噬细胞介导的促血管生长，在一定程度上是可以满足日益增长的脂肪组织的需求，但也因巨噬细胞浸润促使并加重了肥胖相关性炎症。