开郁清热方对T2DM降糖调脂减肥整体调节的AMPK信号转导网络机制研究

目前，降糖、调脂、减肥的综合调节已成为2型糖尿病（T2DM）治疗的趋势与难题。新近研究显示，作为糖脂代谢的关键环节，腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）及其信号转导网络对机体物质代谢平衡起重要作用。课题组研究表明，开郁清热方在对T2DM降糖、减肥、减少腹内脂肪的同时，尚具有调节骨骼肌AMPK表达的作用。因此，我们推测对AMPK转导网络的调控可能是开郁清热方对T2DM实现降糖、减肥、调脂整体调节中的关键环节之一。本课题拟采用自发肥胖型糖尿病大鼠OLETF，以AMPK转导通路网络为切入点，应用同位素标记酶活性测定法、实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹、电子计算机断层扫描等技术，整体与离体相结合，机能与代谢检测相结合，为进一步阐明开郁清热方治疗T2DM糖、脂、肥整体调节机制提供细胞与分子水平上的依据，为中医药治疗代谢紊乱性疾病提供新的思路与方法。

糖尿病治疗已经超越以降低血糖为中心的传统观念，单纯降糖、减肥、调脂均不能较好控制糖尿病及其并发症的发生与进展。腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)作为机体能量感受器，在糖脂代谢中发挥着极为重要的作用，该酶本身以及其信号转导网络对保持机体物质代谢平衡起重要作用。课题应用糖尿病模式动物OLETF，通过应用口服糖耐量实验、高胰岛素正糖钳夹技术研究证实，开郁清热方对T2DM糖代谢、脂代谢、腹内脂肪含量具有较好整体调节作用，并可改善实验动物胰岛素抵抗、保护其胰岛功能。其降糖机制可能与上调骨骼肌AMPK活性(P<0.05)，调节骨骼肌GLUT4表达改善胰岛素抵抗有关。其调脂机制与上调肝脏AMPK活性(P<0.05)，调节脂肪合成基因重要转录调节因子SREBP1-c有关(P<0.05)。脂肪组织不仅是能量的储存器官, 还是一个功能活跃的内分泌器官,在能量代谢平衡中起着重要的作用，研究显示开郁清热中药能够提高脂肪细胞葡萄糖消耗(P<0.05)，同时可促进脂肪细胞脂联素分泌、减少瘦素分泌，这可能是其改善IR的作用机制之一。开郁清热中药可能通过上调脂肪细胞AMPK活性(P<0.05)，干预脂肪细胞上调GLUT4基因表达而改善糖代谢，调节HSL、ACC磷酸化水平(P<0.05)，从而对脂代谢起到较好的干预作用。由此推测开郁清热中药干预T2DM的降糖调脂减肥作用可能与其调节脂肪组织AMPK活性有关，脂肪组织可能为其重要的作用靶器官。