新布尼亚病毒形态特征及形态发生研究

Severe fever with thrombocytopenia syndrome is an emerging infectious disease since 2007 caused by a novel phlebovirus in the Bunyaviridae family, designated SFTS bunyavirus (SFTSV). The SFTSV morphology investigation have not been reported till now. In this project, the SFTSV morphological feature and morphogenesis process including pathway of SFTSV entrance, virus location in cells, egression will be investigated with electron microscopy. The property and functions of virus associated structures such as granular inclusion bodies, filamentous inclusion bodies as well as cell ultrastructural change will also be investigated. This research could contribute the study of SFTSV morphological identification, replication and pathogenic mechanism.

发热伴血小板减少综合征是2007年发现的由新型布尼亚病毒（即发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒，Severe Fever with Thrombocytopenia Syndrome Bunyvirus，SFTSV）感染导致的严重危害人类健康的重要新发疾病。SFTSV属于布尼亚病毒科白蛉病毒属的新成员，目前SFTSV的形态特征及形态发生过程尚不明确。本课题组研究表明SFTSV的形态及其形态发生过程与已知布尼亚病毒有所不同。本项目拟在先期研究的基础上，主要通过电子显微镜技术，在形态学上明确SFTSV的结构特征、进入细胞的方式、病毒与细胞器的形态关系、病毒的释放方式、病毒相关结构的形态及成分和宿主细胞超微病结构的变化，以探索SFTSV的形态发生的规律和特点，本研究将丰富SFTSV的生物学知识，并为SFTSV的形态鉴定、复制过程、致病机制等研究提供依据并打下基础。

项目背景：新布尼亚病毒（severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus, SFTSV）是导致发热伴血小板减少综合征的病原体，是2007年新发现的一种病毒，目前SFTSV的形态特征及形态发生过程尚不明确。.2、研究内容：（1）SFTSV形态特征研究：病毒表面及病毒内部结构研究。（2）SFTSV形态发生过程研究：病毒进入宿主细胞的方式和在宿主细胞内的形态发生过程，及病毒形态发生过程中病毒相关结构性质研究。.3、重要结果、关键数据：.（1）初步确定了SFTSV形态及形态发生过程的几个关键点：.A、病毒负染形态呈圆球形，直径90.1-96.2nm，包被脂质双层膜，包膜上有刺突结构，可呈多形性。常规超薄切片上病毒呈规则球形，形态均一，直径约90nm。.B、病毒出芽、成熟部位：SFTSV可在高尔基复合体的囊泡内出芽，成熟的病毒颗粒出现在高尔基复合体的囊泡内。.C、病毒释放方式：SFTSV可经膜性管状结构到达细胞膜附近释放，还可以通过囊泡方式释放出细胞。.D、滑面内质网参与病毒的形成：病毒颗粒可存在于滑面内质网腔隙内。.E、发现了一些病毒相关结构：病毒感染的培养细胞内可见丝状包涵体、颗粒状包涵体、条索状结构、副结晶状结构、RNP样结构。.F、细胞器参与病毒的形成：病毒感染导致产生的包涵体多位于细胞核附近，通常有线粒体的包绕甚至直接与包涵体其相连。在细胞质内病毒颗粒存在的囊泡周围常存在大量的高尔基复合体。.（2）SFTSV感染宿主细胞后，宿主细胞的超微病理表现为：.A、脂质代谢异常：细胞质内出现大量脂质提堆积。.B、高尔基体增生：高尔基体数量增多，聚集在细胞核附近，部分高尔基囊泡扩张。.C、细胞质内出现代谢旺盛区域：该区域多位于细胞核附近且病毒颗粒往往位于其中。该区域形态学表现为：线粒体在该区域增多聚集，线粒体基质呈浓集呈高电子密度。游离核糖体在该区域聚集增多，该区域呈高电子密度。粗面内质网在该区域增多聚集，且内质网腔扩张。.D、病毒感染导致细胞质内产生包涵体：出现颗粒状包涵体（颗粒状物质构成）及丝状包涵体（丝状结构构成），颗粒状包涵体含有病毒抗原及核蛋白（NP）成分。.4、科学意义：初步阐明了SFTSV的部分形态学特征、部分病毒形态发生过程及复制过程中病毒与细胞之间的形态学相互作用。