不同禽类新城疫病毒感染的细胞差异蛋白分析及功能研究

基本信息
批准号:30972192
项目类别:面上项目
资助金额:35.00
负责人:丁壮
学科分类:
依托单位:吉林大学
批准年份:2009
结题年份:2012
起止时间:2010-01-01 - 2012-12-31
项目状态: 已结题
项目参与者:张学东,王玉平,母连志,李志杰,张泉鹏,高跃,王晓莉
关键词:
新城疫病毒功能差异蛋白质谱
结项摘要

首先将NA-1株鹅源新城疫病毒与F48E9株鸡源新城疫病毒高度纯化并提取病毒全蛋白,2-DE分析蛋白样品,经第一向等电聚焦、第二向SDS电泳及质谱鉴定,阐明不同禽类新城疫病毒蛋白谱;然后,将NA-1株鹅源新城疫病毒和F48E9株鸡源新城疫病毒分别感染鸡胚成纤维细胞,感染前后总蛋白经2-DE分离及图像分析,MALDI-TOF MS/MS鉴定感染前后差异蛋白,研究并诠释其功能;第三,分析并鉴定NA-1及F48E9株新城疫病毒感染鸡的血清差异蛋白。研究目标为寻找出不同禽类新城疫病毒全蛋白的蛋白谱差异;鉴定出不同禽类新城疫病毒感染前后的差异蛋白,阐述差异蛋白的功能及其在新城疫的感染与发病过程中的潜在作用;筛选与新城疫发生相关的血清蛋白标记,为今后标记疫苗的研究和开发以及建立新的诊断方法奠定基础。

项目摘要

本研究首先将鹅源新城疫病毒NA-1株与鸡源新城疫病毒F48E9株进行纯化,然后将鹅源新城疫病毒NA-1株与鸡源新城疫病毒F48E9株分别感染原代鸡胚成纤维细胞,对病毒感染前后的细胞总蛋白进行2-DE分离及图像分析,通过MALDI-TOF MS/MS质谱鉴定出感染前后的差异蛋白共7个,本研究选取其中3个主要差异蛋白进行其功能研究,分别构建3个蛋白基因的真核表达质粒,转染细胞后,检测其对细胞增殖活性及病毒复制增殖能力的影响,结果表明,过表达这3种蛋白后,对多种细胞的增殖活性具有一定的抑制作用;且对新城疫病毒的复制增殖能力也具有一定的抑制或促进作用。提示这3种蛋白可能在新城疫病毒的感染与发病过程中具有一定的潜在作用。. 将新城疫病毒F48E9株以滴度106EID50/0.1ml,经滴鼻的方式感染2月龄种鸡,分别在发病初期(3d)和急性期(5d)采血,分离外周血淋巴细胞,细胞全蛋白样品经2-DE分离及图像分析,通过MALDI-TOF MS/MS质谱鉴定出感染前后的差异蛋白共7个,本研究选取其中3个主要差异蛋白进行其初步研究。

项目成果
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数据更新时间:2023-05-31

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