IFN转录因子IRF-4/IRF-5逆向调控EBV病毒相关的B细胞淋巴瘤凋亡的机制研究

EBV病毒感染与人类淋巴瘤密切相关, 而EBV宿主细胞的转化在肿瘤形成中起重要作用。我们的新近研究发现干扰素调节因子家族成员IRF-4涉及中枢神经系统淋巴瘤的B细胞转化过程, IRF-4在EBV转化的B细胞中有高的表达，IRF4的下调抑制了B细胞的增殖或增强细胞的凋亡。提示IRF-4在EBV感染的B细胞转化和成瘤过程中可能起重要作用。.IRF-4在TLR的介导下与IRF-5在MyD88的中心区域竞争性地结合，从而抑制IRF-5的活性。因此, 我们假设EBV为了完成B细胞的转化过程，利用了细胞内的IRF-4的高表达抑制IRF-5，从而导致对凋亡的保护作用。.本课题将在原有工作的基础上，进一步探讨淋巴细胞特异性转录因子IRF-4和 IRF-5在淋巴瘤细胞增殖和凋亡过程中的作用，为寻找新的淋巴瘤生物治疗手段提供依据。

本课题重点利用B细胞淋巴瘤／鼻咽癌细胞系，探讨EBV以及重要蛋白LMP-1与IFN转录因子IRF-4, IRF-5以及IRF-7的相互关系，进而导致细胞凋亡的路径和机制，研究分为以下几个部分：1）EBV LMP－1介导的IRF4／5对淋巴瘤细胞作用的离体研究；2）EBV LMP－1介导的IRF－7对淋巴瘤细胞作用的离体研究；3）EBV LMP－1对鼻咽癌细胞作用的在体研究, 为深入了解EBV的致癌机制提供依据。本研究已经完成以下研究内容：. 1.本课题阐述了干扰素调节因子 IRF-4/IRF-5在肿瘤细胞增殖或凋亡过程中作用的特性。探讨了 IRF-4/IRF-5在肿瘤细胞增殖或凋亡过程中作用的特性。 通过探索病毒蛋白LMP-1与细胞蛋白(IRF-4/IRF-5) 之间，细胞蛋白(IRF-4/IRF-5) 之间的相互关系及相关的分子事件，进一步了阐述EBV相关B细胞肿瘤细胞凋亡的过程。证明这些现象不仅发生在原发性中枢系统淋巴瘤，而且也可能发生在其他类型的EBV感染的肿瘤。课题阐明了IRF-4 对凋亡的保护机制：通过分析不同凋亡路径的的活性推测 IRF-4 沉默导致细胞凋亡的机制。 . 2.为了进一步澄清EBV的致瘤作用，本研究已经在原课题的基础上，增加了对IRF-7的研究内容。 利用B细胞淋巴瘤细胞系，探讨EBV LMP-1与IFN转录因子IRF-7的相互关系及其导致凋亡的路径和机制。IRF-7是重要的IFN转录因子，也被认为是一种Oncogene，本课题最后阶段，在对IRF4/5研究的基础上，探讨LMP-1同时对IRF－7的影响，既而全面的了解EBV阳性的淋巴瘤中EBV对肿瘤细胞生存和生长的作用程度。. 3.在体研究也取得了初步结果。研究表达外源性si-LMP的鼻咽癌细胞NPC在裸鼠体内成瘤过程中的作用。将不同的si-RNAs用于NPC 细胞并同通过筛选让其稳定表达。选取6～8周龄NU/NU裸鼠，然后将稳定表达的si-LMP-1转染的NPC细胞，接种于每只裸鼠的皮下，观察成瘤时间并每周测量瘤体直径，计算肿瘤体积。于接种后第6周末计算瘤体抑瘤率。 结果显示si-LMP-1对肿瘤细胞生长的抑制作用以及对肿瘤血管形成的的影响。为EBV相关肿瘤的基因治疗提供线索。. 本课题对以上三个研究方向均达到了目标，为下一步课题申请和研究打下了基础。