Ghrelin调节Rip2/NF-κB途径介导的脓毒症全身炎症反应及机理研究

脓毒症是现代危重病医学尚未解决的重大难题，目前针对脓毒症的治疗方案均难以显著提高患者的生存率。研究发现，生长激素促泌素的内源性配体ghrelin在脓毒症时可提高实验动物生存率，显示出很大的临床应用前景。据报道，ghrelin有抗炎作用，可抑制NF-κB的活性；Toll样受体（TLRs）和核苷酸结合寡聚化结构域（Nods）在宿主对抗细菌感染中发挥重要作用，它们可能通过受体相互作用蛋白2（Rip2）起作用，且RIP2激酶活性是下游NF-κB激活所必须的。故本课题采用脓毒症大鼠模型，通过LPS刺激Rip2正常表达和低表达的巨噬细胞，研究ghrelin干预后Rip2和NF-κB、上游TLRs和Nods、下游细胞因子、趋化因子和黏附分子表达的变化，并观察大鼠生存率的变化，探讨ghrelin治疗脓毒症的分子机制。研究结果将为临床脓毒症治疗药物的开发提供重要的实验依据。

脓毒症是由感染引起的全身炎性反应综合征，具有高发病率、高死亡率及发病率逐年增长的特点，是现在危重病医学亟待解决的重大难题。然而，目前所采用的综合疗法，均未能提高脓毒症患者的生存率。ghrelin可以减轻脓毒症导致的急性肺损伤，且可降低脓毒症大鼠的死亡率。然而，ghrelin对脓毒症炎症反应的作用及其具体分子机制尚不完全清楚。此外，脓毒症常引起脓毒症脑病。脓毒症时，ghrelin对心脏、肝脏、肺等易受累外周器官均具有保护作用。然而，ghrelin是否对脑组织具有保护及通过何种机制实现，尚无文献报道。因此，我们分三部分进行本项目的研究：第一部分探讨Ghrelin对脓毒症大鼠肺脏炎症及NOD2/Rip2 mRNA表达的影响；第二部分探讨ghrelin对脓毒症大鼠脑功能障碍的影响及机制；第三部分，LPS和/或ghrelin刺激体外培养的小鼠肺巨噬细胞系RAW264.7细胞。我们发现与CLP组比较，CLP+ghrelin组TNF-α、IL-6、MPO、NOD2 和Rip2 mRNA的表达均显著降低；CLP+ghrelin组与CLP组相比，术后6h和24h时海马TNF-α及IL-6的表达均显著降低，海马区神经元损伤减轻，大鼠神经功能评分显著升高；与LPS刺激组相比，ghrelin组6小时IL-10水平明显上升，且TNF-α及IL-6水平明显下降，且趋势持续至24小时，此外，RIPK2、TLR4、NOD2、TNF、IL-1β、IL-6的mRNA水平均降低。本课题组发现：1. Ghrelin可改善脓毒症大鼠肺脏中性粒细胞的浸润和肺泡毛细血管屏障损伤、下调肺组织炎性细胞因子，且可抑制LPS刺激下的小鼠巨噬细胞的炎症反应，从整体和细胞水平说明其作用可能与抑制NOD2 /Rip2信号通路有关；2. ghrelin可对脓毒症大鼠脑功能起到一定保护作用，其机制可能与下调炎症因子TNF-α及IL-6的表达而减轻海马神经元的损伤有关。培养研究生2名，发表SCI论文4篇，中文文章4篇。