基于P-gp表达信号通路研究解郁化痰方药逆转难治性癫痫多药耐药的分子机制

The mechanism of pharmacoresistance is a key point of intractable epilepsy.While most patients can be treated with antiepileptic drugs, up to 30% of patients respond poorly to pharmacotherapy.Downregulation of multidrug transporters is a useful treatment of intractable epilepsy.As P-glycoprotein greatly influences central nervous system pharmacotherapy, it is important to know the extent to which transporter activity is pathophysiologically modulated.Given the foundation of our advanced researches,we want to find out the mechanisms of Chaibei Zhixian Decoction that how to regulate the expression of p-glycoprotein.We plan to study the cell signals about P-gp from the PXR signaling pathway, GLU/NMDA-R/COX-2 signaling pathway and TNF-α/ET/eNOS/PKC/NF-kB signaling pathway.The technology of Real Time-PCR,Western blot and ELISA will support our researches.Therefore, the clear mechanisms of Chaibei Zhixian Decoction regulating P-gp expression will provide insight into intractable epilepsy.

耐药机制是难治性癫痫研究的关键问题之一。抑制血脑屏障上多药转运体的表达是解决难治性癫痫耐药的一个重要手段。P糖蛋白（P-gp）是其中最为重要也是研究相对深入的一个多药转运体。本研究在前期工作的基础上，借助实时荧光定量PCR（RT-PCR）、免疫印迹（Western blot）、酶联免疫吸附反应（ELISA）等技术，拟通过离体和在体实验观察具有解郁化痰作用的方药柴贝止痫汤调控P-gp表达的PXR信号通路、GLU/NMDA-R/COX-2信号通路和TNF-α/ET/eNOS/NF-kB信号通路，探讨解郁化痰方药柴贝止痫汤逆转难治性癫痫多药耐药的分子机制，为难治性癫痫的治疗提供新思路和新方法。

癫痫是神经科常见疾病，约30%的患者对抗癫痫药不敏感而成为难治性癫痫。耐药机制是难治性癫痫研究的关键问题之一。抑制血脑屏障上多药转运体的表达是解决难 治性癫痫耐药的一个重要手段。P糖蛋白（P-gp）是其中最为重要也是研究相对深入的一 个多药转运体。本研究在前期工作的基础上，运用实时荧光定量PCR（RT-PCR）、免疫印迹（Western blot）、酶联免疫吸附反应（ELISA）等技术，通过离体和在体实验观察具有解郁化痰作用的方药柴贝止痫汤调控P-gp表达的PXR信号通路、GLU/NMDA-R/COX-2信号通路和TNF-α/ET/eNOS/NF-kB信号通路，探讨解郁化痰方药柴贝止痫汤逆转难治性癫痫多药耐药的分子机制，本项目研究发现，中药柴贝止痫汤可下调血脑屏障上COX-2、PGE2、NF-κB、PKCα、eNOS、PXR、P-gp的表达，起下调P-gp的作用机制可能通过了上述三条信号通路，增加进入脑内的AEDs的药物浓度，从而逆转难治性癫痫多药耐药。为中医药更好地参与癫痫的治疗提供了理论依据。