SLPI调控真皮多能干细胞增殖及促创面修复作用的实验研究

我们前期研究显示，真皮多能干细胞是参与创面修复的一种重要修复细胞，高表达分泌型白细胞蛋白酶抑制因子（SLPI）是调控真皮多能干细胞增殖的重要途径，但SLPI调控真皮多能干细胞增殖及促创面修复的作用及机制仍未完全阐明。鉴于ERK通路是调控细胞增殖最重要的信号途径，其活化与SLPI生物学作用密切相关。我们设想，ERK通路可能参与SLPI调控真皮多能干细胞增殖及促创面修复作用。为此，本项目拟采用基因重组表达载体、SiRNA、MTT比色实验、流式细胞术、RT-PCR、Western blot等技术，通过特异拮抗剂阻断ERK信号转导通路，并检测相关信号转导分子含量及活性变化，以探明SLPI调控真皮多能干细胞增殖作用的下游信号转导通路；并通过在体动物实验进一步验证SLPI调控真皮多能干细胞增殖及促创面修复的效果。研究结果对丰富和完善创面修复机制具有重要意义，并可为更好地应用真皮多能干细胞提供实验依据。

组织修复细胞增殖是创面修复的关键环节。真皮多能干细胞是参与创面修复的一种重要修复细胞。分泌型白细胞蛋白酶抑制因子（SLPI）具有促细胞增殖作用。我们前期研究发现，创面修复过程中真皮多能干细胞高表达SLPI，提示SLPI对真皮多能干细胞具有促增殖作用，进而可能促进创面修复进程及结局。为此，本项目构建了SLPI基因及其SiRNA重组表达载体，转染真皮多能干细胞，移植治疗大鼠切割伤创面，观察不同SLPI表达水平（高表达或沉默表达）对真皮多能多能干细胞增殖和创面修复的影响，以评价SLPI调控真皮多能干细胞作用及其对创面修复的促愈效果。结果显示，我们成功构建了SLPI表达载体，并对真皮多能干细胞明确的促增殖作用，ERK信号通路是其发挥作用的重要途径；SLPI参与了真皮多能干细胞的促创面修复作用。本项目研究结果证实了SLPI和真皮多能干细胞促进创面修复的效果，并初步阐明其作用环节及相关机制，对丰富和完善创面修复机制以及进一步寻找促愈措施都具有重要意义。因此本项目研究不仅具有重要的理论意义，而且还有潜在的应用前景。本课题已按计划完成全部研究内容，已发表论文2篇（中英文各1篇），另有中英文论文各1篇已完稿；培养硕士研究生1名，拟今年毕业答辨。