乙肝病毒慢性感染和细胞免疫调节因子与肝细胞癌易感性的分子流行病学研究

乙肝病毒（HBV）感染和肝细胞癌（HCC）的发生关系密切，但确切机制尚不明确。本研究采用大样本病例-对照研究设计，同时结合HBV基因型、PreS/S区和PreC/C区突变和病毒载量等病毒因素和细胞免疫调节因子（包括INF、TGFβ、TNFα、IL等）表达及基因多态性（SNPs）等宿主因素，探讨HBV慢性感染者发生HCC的易感机制。预期验证如下科学假设：（1）HBV病毒相关特征与HBV慢性感染者发生HCC的危险性有关；（2）相关免疫调节因子的功能性SNPs单独或联合与HBV慢性感染者HCC的发生有关；（3）免疫调节因子功能性SNPs通过转录或转录后机制调节其表达水平或生物学活性，影响免疫调节因子血浆水平，存在基因型-表型相关关系；（4）易感基因相互之间以及易感基因与HBV病毒特征存在交互作用，并在HBV慢性感染者发生HCC的过程中发挥重要作用。

以新近报道的在全基因组关联研究中（GWAS）发现的与HBV感染后持续感染或清除感染相关的4个人类白细胞抗原（HLA）SNP位点（rs3077、rs9277535 in HLA-DP和rs2856718 、rs7453920 in HLA-DQ）为目标位点，采用大样本的病例对照研究，以1300例HBsAg阳性HCC患者为病例组，1344例HBV感染后清除感染者及1344例慢性HBV感染者为对照组，研究这4个位点与HBV感染后清除感染或慢性HBV感染后发生HCC危险性的关系。结果发现这4个SNP位点的变异可显著降低HBV感染后持续感染的危险性，而rs3077和rs2856718两个位点的变异可显著降低慢性HBV感染者发生HCC的危险性。进一步分析4个位点变异在HBV感染后清除或慢性感染后发生HCC中的联合效应，结果显示随变异等位基因位点数的增加，HBV感染后发生持续感染或慢性HBV感染者发生HCC的危险性显著降低。.我们还进行了一个包括三阶段的GWAS研究。第一阶段为易感位点发现阶段包括了951慢性感染者（病例组）和937例HBV感染自然清除者（对照组），第二阶段易感位点验证阶段包括2,248个病例和3,051对照，第三阶段易感位点验证阶段包括1,982个病例和2,622 自然人群对照。 我们发现了2个新的与乙肝慢性感染相关的多态性位点: 位于6p21.33的rs3130542 (接近HLA-C, odds ratio (OR) = 1.33, P = 9.49 × 10-14) 和位于22q11.21的rs4821116 (位于 UBE2L3, OR = 0.82, P = 1.71 × 10-12)，同时也进一步验证了前期发现位于HLA-DQ的 rs7453920 多态性位点与慢性HBV感染相关，在慢性乙肝相关肝癌的易感性研究中，未发现这3个位点与慢性乙肝病人发生HCC相关。本研究结果表明，除HLA-DP 和 HLA-DQ外， HLA-C和UBE2L3与乙肝病毒感染后的清除或慢性化有关。