C反应蛋白异构体损伤心肌机制及其单链抗体保护作用研究

C反应蛋白异构体（mCRP）是新近发现致动脉粥样硬化的重要分子并可促进心肌细胞的凋亡。最新研究发现，mCRP的199～206位氨基酸抗原表位可与动脉内皮细胞膜表面脂筏（lipid rafts）结合并激活下游信号传导通路。我们根据前期的研究结果推测：在急性心梗时，mCRP与心肌细胞脂筏结合可以促进心肌细胞的凋亡进而导致心肌梗死面积的扩大。本项目拟在细胞及整体水平上研究mCRP与心肌细胞脂筏的作用情况，并采用抗mCRP199～206单链抗体抑制细胞脂筏与mCRP的结合，探讨其对心肌细胞凋亡的保护作用。通过本研究以期阐明mCRP致心肌细胞凋亡的机制，并为心肌梗死的临床治疗提供新思路。

C反应蛋白异构体（mCRP）是新近发现致动脉粥样硬化的重要分子，本研究观察了mCRP对心肌细胞的损伤作用及其相应抗体对其所致损伤心肌的保护作用；此外研究还创新性地自行制备mCRP诊断检测试剂盒，对急性心梗患者血循环中mCRP进行检测，探讨其对于急性心肌梗死的早期诊断中作用。结果发现，（1）mCRP可以通过与心肌细胞膜表面脂筏（lipid rafts）结合并激活下游信号传导通路，活化下游凋亡相关蛋白Caspase3，和bal-x，从而导致心肌细胞凋亡增加，同时mCRP可以促进心肌细胞分泌TNF-alpha和TGF-β，并减少VEGF的分泌；（2）细胞水平证实采用制备的特异性mCRP单抗可以拮抗mCRP导致的心肌损伤作用，并减少心肌细胞凋亡。（3）国内外首创性地制备mCRP检测试剂盒，对急性心肌梗死患者血循环中mCRP进行检测，并证实血循环mCRP是诊断急性心肌梗死的一个良好生物标志物，其对心肌梗死诊断的敏感性和特异性与肌钙蛋白相当。这些研究结果提示mCRP是急性心肌梗死过程中出现的重要的致心肌损伤炎性因子，采用特异性mCRP中和抗体可以阻断其对心肌细胞的不良生物学作用。