疏水改性聚丙烯酰胺在溶液中的缔合凝聚研究

根据鼠抗体结构基因特点，设计了多对特异的重链和轻链高可变区引物，应用细胞内RT-PCR技术在分泌抗人Lp（a）抗体的杂交瘤细胞中逆转录及扩增了重链和轻链可变区基因片段，径SOE技术连接获得单链抗体基因，扩增后克隆噬茵粒表达载体pCANTAB5，转染大肠杆菌TG1，筛选出表达抗人Lp（a）单链抗体的菌落，分离得到特异性单链抗体。为提高单链抗体的产量，我们将表达载体转染大肠杆菌HB2151，经诱导表达出抗人Lp（a）单链抗体，并分泌至培养基中。将从培养基分离纯化的单链抗体进行特性分析，证实其与鼠抗人Lp（a）抗体具有相同的特异性。应用该单链抗体，建立了测定人血清Lp（a）含量的ELISA法，具有良好的应用前景。此外，初步探讨了该表达体系的通性。