参松养心胶囊提高心率的机制研究

Bradycardia is a common clinical problem that can cause either symptoms or life-threatening of the patients. Due to lack of long-term oral chemical drugs, cardiac pacemaker implantation is the only choice for severe bradycardia, which results in a heavy economical burden of patients. Our previous studies showed that Chinese herbs shensongyangxin capsules, along with inhibiting premature ventricular beats, effectively improved sinus bradycardia；Basic research demonstrated that shensongyangxin was a multichannel blocker that exerted the antiarrhythmic effect.On the other hand, it was failed to proven that shensongyangxin increased heart rate due to enhanceing pacemaker current(If), but rather through an unknown general regulatory mechanisms. To investigate the regulatory mechanisms and identify the therapy targets would be a beneficial project in combination study of Chinese and Western medicine. In this study, we will establish ischemia-reperfusion bradycardia rabbit model and using randomized, single-blind and placebo controlled method to clarify the effect of shensongyangxin on bradycardia and identify the differential expression of cardiac genes and proteins. We will then confirm the effect of shensongyangxin capsule on heart rate and elucidate the mechanisms from heart and cell levels by transgene techniques, so that to provide a solid theoretical basis for clinical applications of traditional Chinese herbs.

临床上心动过缓十分常见，轻则引起症状，重则危及生命。至今缺乏可长期口服的西药，只能依赖起搏器治疗，给广大患者带来了沉重的负担。本课题组在前期研究中发现，中成药参松养心胶囊在治疗室性早搏的同时，又能有效提高窦性心动过缓患者的心率；基础实验证实该药能阻滞多种心脏离子通道，治疗早搏，但提高心率不是直接增强起搏电流（If）所致，而是通过某种整体调节机理。研究这一调节机理，阐明作用靶点，是中西医结合研究的有益课题。本课题将建立家兔缺血再灌注心动过缓模型, 采用随机、单盲、安慰剂对照研究方法进行参松养心中药干预，评价其疗效并筛选心脏差异表达基因和相应的差异蛋白，采用心脏、细胞转基因技术，证实差异基因的心率调节功能。从整体、基因和蛋白层面阐明参松养心胶提高心率的作用机理，为中药的临床应用提供确凿的理论依据。

心动过缓是常见的心律失常，其发病率随着老龄化和心血管疾病发病的增加而升高。参松养心胶囊是依据络病理论研制出的新型中药制剂，既能抑制异常心律，又能提高正常心率，临床价值重大。参松养心给治疗缓慢性心律失常带来新希望，但其作用机制不明。本实验采用基因和蛋白芯片、血清学指标、质谱技术以及膜片钳技术等，从整体、器官、细胞以及分子水平上揭示参松养心治疗缓慢性心律失常的机制，为参松养心胶囊的临床应用提供证据。.本研究发现参松养心能提高窦房结功能受损实验兔的心率。参松养心治疗后与肌肉收缩、细胞钙离子稳态、心肌纤维生长、细胞有丝分裂周期、细胞分裂和 DNA复制、有丝分裂等相关的基因表达发生了改变，其中最有意义的是与钙稳态、离子通道以及信号相关的三组基因。膜片钳实验揭示参松养心加速通道失活来减少ICa-L 电流，减慢通道失活后恢复的时间。我们用 iTRAQ对比模型组和参松养心治疗组发现86个差异蛋白，其中44个蛋白数量降低，42个蛋白数量增加。通过富集分析发现这些差异蛋白与钙离子结合有关，与参与细胞骨架组分的构成及氧化磷酸化等有关。参松养心使细胞内RyR2、SERCA2和VDA 数量增加，钙离子相关蛋白如 SLC25A12、S100A8、S100A9、和STAT1等的数量也增加，提示钙稳态在参松养心的治疗作用中起重要作用。心肌的结构蛋白如TLN1、SORBS2、SPTA1 和 SPTB 数量增加，意味着被破坏的心肌结构在一定程度上得到修复。我们还发现参松养心治疗后减少的蛋白与糖脂代谢等过程有关，说明参松养心抑制了心肌的物质代谢。综上，我们的研究结果表明参松养心治疗心动过缓是有效的；参松养心是针对多因素，通过多种途径 以“整合调节”的方式提高心率、保护心肌。我们新增了结合临床探究参松养心对人在基因调控和表达水平提高心率的机制的研究，已入选部分窦性心动过缓患者及健康志愿者，收集了相关临床资料并送检血液标本，预计于2017年年底完成这部分研究。