肿节风有效成分迷迭香酸对哮喘小鼠模型的干预机制

Porcine respiratory diseases and chicken chronic respiratory diseases are the improtant chronic respiratory diseases of livestock. The treatment of this diseases are more difficult than before because of drug resistance. It is impotant for man to search new and effective anti-Infective medicines. Rosmarinic Acid is the active ingredient of Herba Sarcandrae Inj. Test in the premenarche show Rosmarinic Acid has a significant anti-inflammatory effect. In the present study, an OVA-induced bronchial Asthma in mice will be developed, and we will search for the therapeutic efficacy of bronchial Asthma mice. First of all, we will detect the express of correlate cytokine in bronchial Asthma mice by ELISA, and will detect the airway resistance and lung compliance by FinePointe? RC system. Secondly, a observation of pathohistology pathologic histology of lung in mice will be carried out, in order to survey the pathological change. At last, lymph proteinum and neucleoprotein will be extracted, we will identify the exspress level of target protein by Western-blot, and the exspress level of target protein will be detected by laser scanning focus microscope. We will develop the acting mechanism of anti-bronchial asthma of Rosmarinci Acid in Herba Sarcandrae Inj, provide a pharmacodynamics theory for acting in chronic respiratory diseases madicines.

猪喘气病和鸡慢性呼吸道病，是畜禽重要的慢性呼吸道传染病。由于临床上病原微生物耐药加剧，大大增加了治疗难度。因而寻求新的有效而安全的抗感染药物成为亟待解决的问题。迷迭香酸是中药肿节风的有效成分，具有较强的抗菌活性。经前期研究发现，迷迭香酸体外抗炎作用显著。本课题拟通过卵白蛋白（OVA）诱导，建立小鼠支气管哮喘模型。观察迷迭香酸对哮喘造模的抑制作用，首先用ELISA法检测迷迭香酸对哮喘相关细胞因子表达的影响，利用FinePointeTM RC系统检测各实验组小鼠的气道阻力和肺顺应性的变化，再取小鼠肺脏，做病理组织学切片，观察迷迭香酸对哮喘小鼠肺部病理改变的影响，并提取肺组织的浆蛋白以及核蛋白，通过Western-blot方法确证药靶蛋白的表达情况。并利用激光扫描共聚焦显微镜核对靶蛋白的表达情况。从而阐明迷迭香酸抗哮喘的机制，为该药作为抗畜禽慢性感染性疾病药物提供药效学理论依据。

迷迭香酸（（Rosmarinicacid, RA）是一种水溶性的天然酚酸类化合物，广泛存在于肿节风、迷迭香、牛至、薄荷等植物，具有抗氧化、抗炎、抗菌和抗病毒等生物活性。本研究采用卵清蛋白（Ova）诱导建立小鼠过敏性哮喘模型，然后考察迷迭香酸对哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性的影响，为RA做为畜禽呼吸道病防治药物提供药效学试验依据。. 研究结果表明：RA抑制了Ova诱导的过敏性哮喘小鼠模型气道炎症的发展：明显减少BALF中炎性细胞数目；明显降低BALF中IL-4、IL-5、IL-13和总蛋白浓度；显著降低总IgE、Ova-IgE和Eotaxin水平；明显改善AHR和肺组织病理变化；调节MAPK和NF-κB信号通路；抑制AMCase、CCL11、CCR3、Ym2、E-selectin的mRNA 的相对表达水平。研究结果提示，RA能够有效的改善过敏性哮喘小鼠气道炎症，它的机制可能与阻断MAPK（ERK、JNK和p38）以及NF-κB（IκBα和p65）相关。本研究相关研究成果已发表在SCI收录期刊Molecules、International Immunopharmacology上，在国内外具有一定的影响力。. 本研究发表项目署名资助的相关研究论文15篇，其中SCI收录3篇，中文核心期刊8篇，其它中文期刊2篇，会议论文2篇；申请发明专利1项；培养硕士研究生4名。在项目实施过程中，本项目组成功地研制了以肿节风为君药（主要药效成分为迷迭香酸）的国家新兽药“肿节风三清颗粒”（最初名称为：复方肿节风颗粒），目前新兽药注册已进入二审，本项目的研究为肿节风三清颗粒的药效学研究提供了参考，具有很好的推动和指导作用。