复杂生物体系中蛋白质的多维液相色谱分离和质谱鉴定联用方法的研究及应用

本项目针对采用两维凝胶电泳技术分离复杂生物样品中蛋白质组所存在的缺陷，通过对整体蛋白质混合物两种预分离方法比较以及离子交换毛细管色谱与高效加压毛细管电色谱的联用，建立两级两维液相色谱分离-串联质谱鉴定技术体系。该技术体系的建立不仅克服了两维凝胶电泳的缺陷，还弥补了目前采用的"鸟枪法"检测动态范围小，蛋白质检出率低的不足，在方法学研究方面具有重要意义。在所建技术平台的基础上，通过对人肝脏中蛋白质分离和鉴定，构建迄今为止最大的、包含3000个以上蛋白质的人肝脏蛋白质组数据库。进一步对正常和疾病组织中人肝脏蛋白质组的相对定量分析和比较，找出差异蛋白质，为研究人类肝脏疾病发生发展机理、早期诊断、治疗和药物开发提供依据。