lncAMPC调控c-Myc/PARP参与神经内分泌前列腺癌发生及奥拉帕尼治疗的作用及机制研究

Castration-resistant prostate cancer (CRPC) is the main cause of death in patients with prostate cancer, and neuroendocrine prostate cancer (NEPC) is one of the important mechanisms of CRPC development. The PARP inhibitor Olaparib has been approved for treating metastatic CRPC with BRCA1/2 and other gene mutations. Our previous study confirmed that Olaparib had a good therapeutic effect on NEPC. In addition, lncAMPC (lncRNA activated in metastatic PCa) was found to be highly expressed in NEPC, and participate in c-Myc/PARP-DDR signaling pathway..First, we will clarify the effect of lncAMPC on the biological phenotype of NEPC both in vitro and in vivo. Second, we are going to reveal the upstream regulators of lncAMPC and the molecular mechanism of lncAMPC participating in c-Myc/PARP-DDR signaling pathway with RNA pull-down, ChIRP and other experiments. Finally, we hope to explore the efficacy and feasibility of Orapanib combined with targeting lncAMPC in the treatment of NEPC. The aim of this project is to explore the biological function of lncAMPC and its mechanism of regulating c-Myc/PARP in NEPC development and Orapanib treatment processes, and to develop potential therapeutic target and combination therapy strategy.

前列腺癌患者死亡的首要原因是对去势治疗形成抵抗性，而肿瘤神经内分泌化是其重要机制之一。PARP抑制剂奥拉帕尼是第一个被批准用于BRCA1/2等基因突变去势抵抗性前列腺癌的靶向药物。我们的前期研究证实奥拉帕尼对神经内分泌前列腺癌（NEPC）具有良好的疗效；同时发现长链非编码RNA lncAMPC在NEPC中高表达并参与c-Myc/PARP-DDR通路。.本课题的研究内容主要涉及在体内外水平明确lncAMPC对NEPC生物学表型的影响，通过RNA pull-down、ChIRP等技术揭示lncAMPC的上游调控因子及参与c-Myc/PARP-DDR信号通路的分子机制，探索靶向lncAMPC或其上下游关键分子联合奥拉帕尼治疗NEPC方案的疗效。目的是要探究lncAMPC通过调控c-Myc/PARP在NEPC形成及奥拉帕尼治疗过程中的生物学功能和作用机制，以开发治疗NEPC的潜在靶标及联合方案。

目的：由于前列腺癌发生去势抵抗是患者死亡的主要原因，也是目前治疗的难点。为揭示去势抵抗性前列腺癌（castration-resistant prostate cancer，CRPC），尤其是其中具有神经内分泌特征肿瘤（neuroendocrine prostate cancer，NEPC）的形成机制，本研究旨在对新发现的长链非编码RNA（long-noncoding RNA, lncAMPC）在NEPC发生发展及靶向药奥拉帕尼（Olaparib）治疗过程中的作用及机制进行研究。.方法：首先，我们分析了lncAMPC在NEPC患者体液样本及奥拉帕尼处理前后的神经内分泌细胞中的表达水平。随后，从体外细胞系和体内动物模型两个水平研究了lncAMPC在奥拉帕尼治疗NEPC过程中发挥的生物学功能，并揭示了前列腺癌细胞中lncAMPC直接及通过免疫细胞间接发挥促进肿瘤恶性进展的机制。最后，探索了奥拉帕尼治疗NEPC及其耐药形成相关的lncRNA和差异蛋白。.结果：我们发现了lncAMPC在NEPC患者的血液外泌体中表达水平要显著高于早期局限性前列腺癌患者，多中心样本检测结果显示lncAMPC高表达提示根治性前列腺癌患者较早的生化复发时间。体内外实验均证实了lncAMPC能够促进前列腺癌的神经内分泌转变，靶向lncAMPC可显著抑制神经内分泌前列腺癌细胞的增殖和侵袭；且而联合靶向lncAMPC和奥拉帕尼治疗对抑制前列腺癌的生长具有协同作用。机制研究揭示了在前列腺癌细胞内，lncAMPC通过激活LIF/LIFR/Jak1/STAT3通路直接促进肿瘤的恶性进展，同时在肿瘤微环境中lncAMPC还通过LIF/LIFR轴抑制T细胞功能，间接促进肿瘤的发展。转录组测序进一步发现了在NEPC中呈高表达的ASMTL可同时被lncAMPC siRNA和奥拉帕尼所抑制，而CXCL12和CD106在奥拉帕尼治疗后被显著上调，但可被lncAMPC siRNA和奥拉帕尼联合处理所抑制。而RNA pull-down揭示了lncAMPC可分别直接结合ASMTL mRNA以及泛素化链接酶TRIM25蛋白。.结论：本研究发现lncAMPC与前列腺癌的神经内分泌转变密切相关，lncAMPC在NEPC中激活LIF/LIFR通路促进肿瘤的恶性进展和免疫逃避，而靶向lncAMPC可以治疗奥拉帕尼耐药的NEPC。