猪肺炎支原体促进猪圆环病毒2型感染与增殖的机理研究

猪肺炎支原体（Mhp）与猪圆环病毒2型（PCV2）共感染非常普遍，能引起多种严重的临床疾病，造成严重的经济损失。研究发现，Mhp与PCV2混合感染引发的严重疾病与猪体内PCV2大量增殖有关。然而，对于Mhp引起PCV2大量感染与增殖的机制尚不清楚。由于PCV2感染主要通过受体介导的内吞作用进入靶细胞，并在胞内体-溶酶体系统内完成脱衣壳过程而进行复制。整个感染复制过程又受到很多通路的调控，另外机体免疫系统的改变也与PCV2的感染和复制相关。本项目拟通过建立Mhp与PCV2体内与体外共感染模型，分别检测影响PCV2感染与复制过程中的各因素，如靶细胞表面受体表达、膜胆固醇含量、细胞内溶酶体系统酸化、Rho-GTPase通路及ERK通路活性等，研究Mhp对PCV2感染与复制各环节的影响；另外通过体内共感染模型研究Mhp感染引起机体免疫系统的改变对PCV感染与复制的相关性。

猪肺炎支原体（Mhp）与猪圆环病毒2型（PCV2）共感染非常普遍，能引起多种严重的临床疾病，造成严重的经济损失。PCV2感染引发的严重疾病与猪体内PCV2大量增殖有关，本研究着重研究Mhp引起PCV2大量感染与增殖的机制。本研究首先分别在体内与体外建立了Mhp与PCV2共感染模型。在体外，PCV2在猪肾上皮细胞系（PK15）中的增殖受Mhp感染顺序、感染菌株以及感染剂量与活力相关。在PCV2感染后再接种Mhp可加强PCV2的增殖，并且与Mhp感染剂量呈正相关。Mhp在PK15细胞上促进PCV2增殖的机制可能与Mhp促进PK15细胞内体-溶酶体系统的酸化，以及抑制ERK 通路中磷酸化ERK激酶活性相关； 而与PK15细胞膜上PCV2受体（硫酸乙酰肝素）的表达以及膜胆固醇的消耗无关。在体内，Mhp与PCV2共感染组较PCV2单独感染组表现出更为严重的肺部病理损伤；而且Mhp与PCV2共感染后相比PCV2单独感染组能刺激更多的TNFα分泌，尤其是PCV2+Mhp组。这与共感染组相比PCV2单独感染组表现出更强的肺部炎性反应与一致的。从个别猪的数据可以推测PCV2的大量复制与趋化因子IL-8的大量分泌，引起更强烈的炎性反应（TNFα大量表达）是存在紧密联系的。另外，本研究各组试验猪中与机体免疫机能相关的IFNγ和IL-10分泌量差异并不是特别大，同时PCV2单独感染组与两病原共感染组相比，PCV2的病毒血症与组织滴度差异均不显著。因此，本研究暂无法确定猪体免疫机能的激活或抑制对PCV2增殖所产生的影响。