禽戊型肝炎病毒中国分离株致病性及跨种系感染研究

Infection of chickens with avian hepatitis E virus (HEV) causes big liver and spleen (BLS) and an egg drop syndrome. In 2010, we isolated a strain of avian HEV from chickens with BLS, which belongs to avian HEV genotype 3. Previously, we found that approximately 1% healthy people had the specific antibodies against avian HEV and other researchers demonstrated that avian HEV was detected in fecal and blood samples from pigs experimentally infected with avian HEV, indicating that avian HEV could infect mammals and be zoonotic. In this grant project, we propose to infect SPF chickens with different doses of CaHEV via different routes. We will examine fecal virus shedding, viremia, serum ALT, seroconversion and gross and microscopic tissus lesions to elucidate the pathogenecity of CaHEV. We will use CaHEV to infect piglets and human cell lines, detect fecal virus shedding and viremia and the virus in cells and cell culture to determine the potential infection of mammal. Finally, we will infect pigles with CaHEV and swine HEV to analyze the potential recombination of the genomes of these virues. The completion of this grant project will provide the understanding of the pathogenicity of avian HEV in chickens and pave the way for the prevention and control of avian HEV infection.

禽戊型肝炎病毒（HEV）感染导致鸡肝脾肿大和产蛋量下降。2010年，我们从肝脾肿大的病鸡中检测并分离到我国首例禽HEV（命名为CaHEV），属于禽HEV基因3型。我们前期研究发现约1%健康人血清中含有禽HEV特异性抗体。其他学者发现在禽HEV感染的猪粪便和血液中检测到病毒。这些研究结果提示：禽HEV可能感染哺乳动物，造成潜在人兽共感染。本项目拟利用不同剂量CaHEV经不同途径感染SPF鸡，通过检测粪便排毒、病毒血症、血清ALT的量和抗体消长差异及病理学损伤，阐明CaHEV的致病性；利用CaHEV感染仔猪和人源细胞系，通过检测粪便排毒和病毒血症，细胞内外病毒量等指标，阐明CaHEV感染哺乳动物及人类的可能性；利用CaHEV和猪HEV共感染仔猪，通过检测感染猪样品中病毒全基因组，探明两种病毒共存于猪体内时可能发生的基因重组。系统阐明CaHEV的致病性及跨种系感染，为禽HEV感染的防治奠定基础。

禽戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus, HEV）在肝脾肿大、产蛋率下降和健康的鸡只中均可检测到。因此，禽HEV与鸡肝脾肿大病和产蛋率下降是否存在直接的病原关系仍需要动物实验验证。此外，越来越多的证据证明，HEV是一种人畜共感染病毒，禽HEV是否跨种属感染其它哺乳类动物仍一直存在争议。基于存在上述的科学问题，本项目的主要研究内容包括通过动物实验分析禽HEV中国分离株（CaHEV）对鸡只的致病性，通过不同感染途径和不同剂量对鸡只的致病差异，对蛋鸡的致病表现以及对公鸡和母鸡的致病差异。在跨种属感染方面，动物实验分析CaHEV能否感染猪和兔，并分析其体外能否感染人源和猪源的细胞系。我们的研究结果发现，高剂量CaHEV（108GE）感染可引起鸡只肝脾肿大，而低剂量（104GE）仅引起鸡只一过性粪便排毒和病毒血症；CaHEV感染蛋鸡可以起产蛋率下降10%-30%；CaHEV在母鸡体内的复制效率高于公鸡；首次证实了CaHEV可跨种属感染兔子，但并不能感染猪；体外感染证明CaHEV不能感染人源和猪源细胞系。综上，本项目系统评估了CaHEV感染对鸡只的致病性，首次证明了CaHEV与鸡大肝大脾病和产蛋率下降的直接病原关系，提示禽HEV感染会对养禽业造成严重的经济损失，必须引起足够的重视。首次证明CaHEV可跨种属感染兔子，引起兔子的粪便排毒，病毒血症和血清转阳，提示禽HEV在不同物种适应感染的遗传进化规律。