中国人群常见HLA-A2亚型之间抗原特异性差异的实验研究

随着HLA分型技术的发展，DNA分型技术已经将传统上根据HLA分子抗原特异性所鉴定的型别进一步区分为若干亚型。但是人们尚不完全清楚不同亚型之间是否存在抗原特异性的差异，这个问题直接关系到疫苗设计和移植供者选择。本项目利用 "单个HLA-A2亚型差别的淋巴细胞-自身单核细胞共培养"体系，该体系的特点是刺激细胞与效应细胞之间仅存在HLA-A2亚型的差异，通过共培养体系中效应细胞增殖活化程度来定量测定不同HLA-A2亚型在抗原特异性上的差异。预期将阐明中国人群中常见HLA-A2亚型（-A*0201、-A*0203、-A*0206、-A*0207）之间抗原特异性的差异程度。

MHC分子（鼠为H-2，人为HLA）的功能是将抗原肽提呈给T细胞识别，诱导抗原特异性T细胞发生增殖活化，进而产生免疫效应。T细胞抗原受体（TCR）识别的配体是抗原肽/MHC复合物（pMHC）。不同型别MHC分子之间的抗原特异性差异已经广为人知，例如应用同种异体移植的体外模型混合淋巴细胞培养，能够观察到不同型别MHC分子诱导淋巴细胞增殖。但是，人们尚未十分明确相同血清型的各亚型之间在抗原特异性方面是否存在差异，阐明这个问题有利于多肽疫苗设计和随机移植供者选择。.HLA-A2是HLA-A座位上最常见的型别，在汉族人中HLA-A2阳性者占50%左右，其亚型在中国人群中分布频率较高的有HLA-A*0201、HLA-A*0203、HLA-A*0206、HLA-A*0207。虽然，这些亚型之间仅在抗原肽结合槽部位存在极少数几个氨基酸的差异，仍有研究提示，不同HLA-A2亚型之间由于抗原肽结合槽部位氨基酸的差异，使得它们在抗原提呈和T细胞识别方面有一定的差异。但是由于HLA具有高度的多态性和单倍型遗传的特点，很难找到仅HLA-A2亚型存在差异的样本，目前尚缺乏HLA-A2亚型间抗原特异性存在差异的实验证据。.本项目建立和使用了 “单个HLA-A2亚型差别的淋巴细胞-自身单核细胞共培养”体系，该体系的特点是刺激细胞与效应细胞之间仅存在HLA-A2 亚型的差异，通过共培养体系中效应细胞增殖活化程度来定量测定不同HLA-A2 亚型在抗原特异性上的差异。.我们选择了不同HLA-A2亚型型别组（包括HLA-A*0201型别组与其它HLA-A2常见亚型型别组）的外周血样本进行了上述实验，观察到HLA-A*0201型别组与HLA-A*0203型别组的增殖系数之间有统计学差异，其增殖系数分别为0.012±0.109，0.124±0.067（P≤0.05）； HLA-A*0201型别组与HLA-A*0206型别组的增殖系数之间可观察到显著统计学差异，其增殖系数分别为0.012±0.109，0.225±0.184（P≤0.01）；HLA-A*0201型别组与HLA-A*0207型别组的增殖系数之间未观察到统计学差异，其增殖系数分别为0.012±0.109，0.050±0.109（P＞0.05）。