油菜抗病相关基因人工微RNA干扰突变体库的创建与重要基因鉴定

油菜是我国重要的油料作物之一，在国民经济中起着重要的作用。菌核病是我国油菜生产的主要限制因子之一。开展具有自主知识产权的油菜抗病相关基因克隆，培育抗病品种是目前的迫切任务。本课题基于本研究室自主开发的油菜防御cDNA芯片分析结果，筛选出了一批抗病相关候选基因。本研究拟构建这些基因的人工微RNA植物表达载体，利用本课题组开发的高通量油菜转化技术转化油菜，建立基于人工微RNA干扰的油菜抗病相关功能基因沉默突变体库；通过抗病性鉴定选择2-3个重要的基因进一步研究其功能，如确定其作用性质（转录因子、抑菌蛋白或酶类等），基因沉默后对不同防御信号途径中防御基因的表达变化，研究其所处的防御途径的位置等，从而初步明确其抗病分子机制。本课题首次在油菜中建立高效的人工微RNA技术和油菜RNA干扰突变体库，对促进油菜抗病相关基因研究与品种培育，推进油菜功能基因学的研究具有重要的理论和实践意义。

油菜是我国重要的油料作物之一，在国民经济中起着重要的作用。菌核病是我国油菜生产的主要限制因子之一。开展具有自主知识产权的油菜抗病相关基因克隆，培育抗病品种是目前的迫切任务。本课题基于本研究室自主开发的油菜防御cDNA芯片分析结果，筛选出了100个抗病相关候选基因，构建这些基因的人工微RNA干扰植物表达载体。采用新型、高效人工微RNA干扰技术鉴定油菜基因功能，获得了一批可能与菌核病抗性相关和与育性相关的基因。进一步完成了其中15个基因的功能研究，其中具有自主知识产权的、具有重要应用价值的基因4个（3个抗病相关基因，1个育性相关基因）。明确两个ERF转录因子不同的抗病分子机制。本研究不仅在油菜中建立利用人工微RNA干扰技术鉴定油菜基因功能的技术平台，而且为揭示油菜抗菌核病的分子机制提供了新的思路。