PAF对脊髓损伤后小胶质细胞靶向激活的分子机制研究

Inflammation is a very important pathological change in spinal cord injury(SCI) and main barrier for behavior restore.Regulationn of inflammation is an important pathway in SCI treatment.Inflammation process is influenced by many factors, inflammatory mediators and cytokines are important initiating and promoting factors. Under the cascade effect, harmful micro-environment formed in the local spinal cord which became the disadvantageous condition for function restore. Researches has shown that the synthesis synthesizing enzyme of platelet activating factor (PAF) increased in SCI, the up-expression of PAF may aggravate the inflammatory response after SCI. Our preliminary experiment showed that PAF involved in the activation of microglia cells in SCI, blocking PAF signaling inhibits the release of related inflammatory cytokines. Therefore, we hypothesized that PAF plays important role in the activation of microglia and release of inflammatory cytokines. The project aims to observe the effect of PAF on activation of microglia and NF-κB and JAK2-STAT3 signal pathway under the precision-cutting spinal cord injury model in mice. Investigate the molecular mechanism of PAF on the activation of microglia. The purpose of this study is to reveal the mechanism of the PAF on the activation of microglia after SCI, provide favorable conditions for the effective regulation of microglia, which has important theoretical value and practical significance.

炎症反应是脊髓损伤的重要病理变化过程。调控炎症反应已经成为当前脊髓损伤治疗的重要手段。炎症介质和相关细胞因子是炎症反应过程中重要的始动和促发因素。在级联放大效应作用下，在脊髓损伤局部形成有害的微环境，不利于神经功能的恢复。有研究表明，脊髓损伤后局部血小板激活因子（PAF）的合成限速酶合成明显增强，PAF表达上调可能加剧脊髓损伤后炎症反应。我们的预实验提示，在脊髓损伤后，PAF参与小胶质细胞的激活，阻断PAF信号抑制了相关炎症因子的释放。所以，我们推测PAF具有激活小胶质细胞，促进炎症因子释放的作用。本项目通过建立小鼠脊髓精准切割伤模型，观察PAF信号对脊髓损伤后小胶质细胞的激活作用，以及NF-κB和JAK2-STAT3信号通路的变化。探讨PAF对小胶质细胞激活的分子机制。本研究旨在揭示PAF对脊髓损伤后小胶质细胞激活的作用机制，为实现炎症反应的有效调控创造有利条件，具有重要理论和现实意义。

炎症反应是脊髓损伤的重要病理变化过程。调控炎症反应已经成为当前脊髓损伤治疗的重要途径。炎症介质和相关细胞因子是炎症反应过程中重要的始动和促发因素。在级联放大效应的作用下，在脊髓损伤局部形成有害的微环境，不利于神经功能的恢复。有研究表明，脊髓损伤后局部血小板激活因子（PAF）的合成限速酶合成明显增强，PAF表达上调可能加剧脊髓损伤后炎症反应。我们的预实验提示，在脊髓损伤后，PAF参与小胶质细胞的激活过程，阻断PAF信号抑制相关炎症因子的释放。所以，我们推测PAF具有激活小胶质细胞，促进炎症因子释放的作用。本项目通过建立脊髓精准切割伤小鼠模型，观察PAF信号对脊髓损伤后小胶质细胞的激活作用，以及NF-κB信号通路的变化。探讨PAF对小胶质细胞激活的分子机制。本研究旨在揭示PAF对脊髓损伤后小胶质细胞激活的作用机制，为实现小胶质细胞的有效调控创造有利条件，具有重要的理论价值和现实意义。.脊髓损伤后，损伤局部可见大量小胶质细胞激活，伤后7天为高峰，随后逐渐下降。和Wt组相比，PAFR-ko组脊髓组织局部见更多数量的小胶质细胞聚集和激活；同时，Western blot 结果显示，PAFR-ko组脊髓组织内细胞因子IL-6水平在损伤急性期(7dpi)明显下调，和Wt组相比，差别具有显著的统计学意义（p<0.05）。与脊髓损伤后小胶质细胞相对应的是NF-kB信号通路的重要组分P65在损伤后明显上调，抑制蛋白IkB也相应上调；与Wt组相比，PAFR-ko组P65在损伤后受到明显抑制，抑制蛋白IkB也相应明显上调，差别具有显著的统计学意义（p<0.05）。两组动物的脊髓损伤后Rotarod test 和上肢力量评分结果显示：脊髓损伤后，两组动物的评分值均下降到“0”水平，并呈现随时间逐步提高的趋势；从14dpi开始，和Wt组相比，PAFR-ko组评分明显提高，至42dpi，PAFR-ko组评分值仍明显高于Wt组评分，差别具有显著的统计学意义（p<0.05）。