Th17对日本血吸虫抗独特型抗体NP30诱导抗病免疫的影响

鉴于单纯化疗难以完全阻断血吸虫病的传播，血吸虫病疫苗的研究被WHO列为优先发展的战略。申请者利用杂交瘤技术制备了一株日本血吸虫抗独特型抗体，定名为NP30。应用NP30主动免疫山羊和小鼠，具有抗感染免疫和抗病免疫的双重功效。本研究项目拟观察Th17在NP30免疫保护效应中的作用，通过体内、外实验检测NP30免疫前后IFN-γ、IL-17等细胞因子和Foxp3、RORγt转录因子水平变化，探讨Treg和Th17与NP30免疫调节的相互关系；在NP30免疫小鼠中注射抗IL-17中和性抗体，研究IL-17对NP30免疫效应的影响，试图探讨能否通过抑制Th17分化来提高NP30的免疫保护力。

鉴于单纯化疗难以完全阻断血吸虫病的传播，血吸虫病疫苗的研究被WHO列为优先发展的战略。研究者利用杂交瘤技术制备了一株日本血吸虫抗独特型单克隆抗体，定名为NP30，应用NP30主动免疫山羊和小鼠，发现其具有抗感染免疫和抗病免疫的双重功效。本研究目的为观察Th17在NP30免疫保护效应中的作用，同时检测NP30免疫后小鼠其他各辅助性T细胞的变化。本项目检测了NP30和SEA体外对DC细胞的影响，发现NP30和SEA均具备有限的促DC成熟能力，能改变DC的细胞因子分泌谱，进而改变CD4+T细胞分化方向，结果提示SEA及NP30均可促进Th17分化，同时NP30还可促进Th2方向分化；建立小鼠血吸虫感染模型，检测NP30和SEA免疫后，脾CD4+T细胞、骨髓源DC细胞、肝细胞IL-4、IL-5、IL-6、IL-23、IFN-γ，IL-17和TGF-β等细胞因子水平，虽然各组织来源的细胞分泌的因子水平不完全相同，但分化趋势大体一致，NP30免疫倾向于Th17和Th2方向，有时也向Th1方向；而SEA免疫倾向于Th17方向，有时也向Th1方向分化。虽然以往研究发现各型辅助T细胞之间具有拮抗作用，但本研究结果显示血吸虫感染刺激CD4+T细胞向多种方向分化，多种细胞因子均可升高，而并非仅表现单一分化趋势。其原因可能是血吸虫及其虫卵表达较复杂的抗原成分，当其侵入小鼠体内后，各种不同抗原刺激CD4+T，即可能产生多种分化方向的结果，而研究者最终测得的培养上清中细胞因子浓度，则是所有刺激叠加后得到的综合结果；建立NP30免疫血吸虫感染模型，腹腔注射抗IL-17A中和抗体，检测该中和抗体对NP30免疫效应的影响，结果显示抗IL-17A中和抗体可提高NP30免疫的减虫率和减卵率，肝脏虫卵肉芽肿有所减小，表明抑制Th17分化可减轻血吸虫感染导致的小鼠肝脏免疫病理损害，提高NP30的免疫保护力。