噬血细胞综合征中EB病毒异位感染免疫细胞的机制研究

Hemophagocytic lymphohistiocytosis(HLH) is a severe disease with rapid progression and high mortality, occurring as either a familial disorder or a sporadic condition, in association with a variety of triggers. EB virus (EBV) infection is the main cause and complication of HLH, which can be used as an independent factors related to EBV-HLH and may trigger HLH in patients with any form of familial disease, meanwhile can also exist in the lymphoma associated HLH. It is suggested that EBV etopic infect immunocyte could play a critical role in developing HLH. In this study, combined with EBV infection in the population as the object, including infectious mononucleosis, primary HLH, EBV-related secondary HLH and lymphoma associated HLH. We identify the differences of EBV-infected immune cells in different types of diseases by flow cytometry and in situ hybridization, the distinctive of EBV cloning by Southern blot and high-throughput DNA sequence detecting and the various of NK cell activities of host in using cell transfection technology combined flow cytometry. Through this study, we analyze the characteristics of diseases in different types of EBV infection, and provide the basis for the mechanism of EBV etopic infectiong immunocyte in HLH.

噬血细胞综合征(HLH)是一种进展迅速，高死亡率的危重疾病。EB病毒(EBV)感染是HLH发生过程中最主要的诱因和合并症而威胁生命。我们前期研究发现，EBV感染不同类型的免疫细胞可能是导致HLH发病的重要原因之一，但其异位感染免疫细胞的机制尚不明确。本研究主要以合并EBV感染的HLH患者为对象。首先通过流式细胞术和原位杂交法鉴定不同疾病类型的患者EBV感染的免疫细胞类型之间的差异；其次通过Southern blot和高通量DNA测序检测不同疾病中EBV克隆性差异，明确EBV病毒株的特异性可能导致其选择性亲和不同类型免疫细胞。再次采用细胞转染技术联合流式细胞术检测NK细胞活性的方法比较各组患者的免疫状态的差别，明确宿主免疫功能可能是造成EBV异位感染免疫细胞的重要基础。通过本项目旨在研究EBV异位感染免疫细胞的机制，为进一步阐明HLH 发病机制提供基础。

噬血细胞综合征是一种进展迅速，高死亡率的危重疾病。EB病毒感染是噬血细胞综合征发生过程中最主要的诱因和合并症而威胁生命。EB病毒感染不同类型的免疫细胞可能是导致HLH发病的重要原因之一。本研究主要以合并EB病毒感染的患者为研究对象，首先通过流式细胞术和原位杂交法鉴定不同疾病类型的患者EB病毒感染的免疫细胞类型之间的差异；其次采用双链DNA捕获技术对各组患者EB病毒株进行基因组序列分析，寻找单核苷酸多态性或特异性基因型；再次采用细胞转染技术联合流式细胞术检测NK细胞活性的方法比较各组患者的免疫状态的差别。.通过本研究，证实了在EB病毒感染相关的疾病中，传染性单核细胞增多症、原发性噬血细胞综合征、EB病毒相关噬血细胞综合征以及淋巴瘤相关噬血细胞综合征患者受EB病毒感染的免疫细胞存在差异。通过对受染免疫细胞的EB病毒定量检测，可以大致区分EB病毒感染性疾病的类型。通过双链DNA捕获技术对EB病毒基因型进行分类，初步发现在EB病毒相关噬血细胞综合征患者和淋巴瘤相关噬血细胞综合征患者的EB病毒株型发生插入和缺失突变的频率明显高于其他合并EB病毒感染的疾病类型，提示EB病毒相关噬血细胞综合征的EB病毒株与特点与预后疾病的临床异质性相关。通过对宿主NK细胞功能检测，发现原发性噬血细胞综合征患者NK细胞活性明显下降，传染性单核细胞增多症患者的NK细胞活性正常范围，而EB病毒相关噬血细胞综合征患者得NK细胞活性则存在普遍的轻度下降。既往健康的个体在EB病毒感染后发生噬血细胞综合征，与其免疫细胞的隐匿性受损存在关系。.这些研究结果为进一步阐明造成EB病毒相关噬血细胞综合征的疾病异质性的可能原因和发生机制，可以为理解EB病毒相关噬血细胞综合征的本质，进行分层个体化治疗以及寻找免疫靶点提供了一定的理论基础。