miRNA-135a在肝癌干细胞自我更新中作用的研究

Cancer stem cells (CSCs), also termed as tumour-initiating cells (TICs) or tumourigenic cancer cells have a crucial role in carcinogenesis, tumor growth, metastasis and relapse. The current therapeutic strategies which can not eradicate cancer stem cell always cause relapse and metastasis. The strategies that specifically target cancer stem cells should eradicate tumors more effectively and reduce the risk of relapse and metastasis. To date, CSCs have been identified and isolated form several human tumors by diverse surface molecules through fluorescence-activated cell sorting (FACS), or magnetic activated cell sorting (MACS). However, the tumor relapse and metastasis still exist when take the therapeutic strategies targeting the cancer stem cells by these surface molecules. So, it is necessary to develop new strategies targeting the cancer stem cells. Nanog is reported to play a crucial role in maintaining self-renew of CSCs.Our previous study found that the expression of miR-135a in Nanog positve CSCs was more than that in non-CSCs.And over-expression of miR-135a increased Nanog expression in Hepatocellular Carcinoma（HCC）cells. In the present study, we will analysis the function of NF-κB/miR-135a/Nanog pathway in regulating CSCs self-renew and find the possible of targeting Nanog pathway in cancer therapy. Targeting CSCs through Nanog pathway should be a promising therapeutic strategy to cure cancer.

肿瘤干细胞导致肿瘤复发、转移和耐药性，严重威胁患者的生存质量。通过特异表面分子靶向肿瘤干细胞能有效改善治疗效果，但仍无法彻底解决肿瘤转移及复发等问题。揭示肿瘤干细胞的核心特性- - 自我更新的调控机制有望成为靶向肿瘤干细胞治疗的新切入点。干细胞多能因子Nanog具有维持干细胞自我更新及多能性的作用，处于干性相关调控网络的核心位置。揭示其在肿瘤干细胞自我更新中的调控机制，有助于寻找从Nanog角度靶向肿瘤干细胞的治疗策略。我们的研究发现Nanog阳性肝癌细胞高表达促进肝癌门静脉癌栓发生的分子miR-135a，而miR-135a能够上调Nanog在肝癌细胞中的表达。本研究在这个基础上以肝癌干细胞为对象：1、研究NF-κB/miR-135a/Nanog信号通路调节肝癌干细胞自我更新的作用机制。2、利用细胞和动物模型研究以该通路为切入点的肿瘤治疗效果。通过这一研究以期为临床治疗肿瘤提供有效的参考方案

肿瘤干细胞导致肿瘤复发、转移和耐药性，严重威胁患者的生存质量。通过特异表面分子靶向肿瘤干细胞能有效改善治疗效果，但仍无法彻底解决肿瘤转移及复发等问题。揭示肿瘤干细胞的核心特性--自我更新的调控机制有望成为靶向肿瘤干细胞治疗的新切入点。干细胞多能因子Nanog具有维持干细胞自我更新及多能性的作用，处于干性相关调控网络的核心位置。揭示其在肿瘤干细胞自我更新中的调控机制，有助于寻找从Nanog角度靶向肿瘤干细胞的治疗策略。本项目主要目标是以Nanog相关的非编码RNA为切入点，探讨其在肿瘤干细胞自我更新中的作用及分子机制。.通过本项目的研究，我们建立了pNanog-promoter-GFP报告质粒为基础的流式分选体系，以此为基础开展了Nanog相关非编码RNA-miR-135a的相关研究。通过体内/外肿瘤模型中研究发现miR-135a具有激活Nanog表达、促进肿瘤干细胞自我能更新的能力，且miR-135a在肿瘤干细胞中高表达是由Nanog调控的。这提示肿瘤干细胞在自我更新中存在一个正反馈调控通路。另外，我们还发现了一个Nanog调控的长链非编码RNA-ICR同样参与了肝癌肿瘤干细胞的自我更新调控。在机制方面ICR通过与肝癌干细胞标记分子ICAM1mRNA分子在序列上的部分互补，稳定其mRNA分子、上调其蛋白水平，促进肿瘤干细胞的自我更新。结合本团队早期研究肝癌肿瘤干细胞中ICAM1的表达受到Nanog 调控，这些结果提示Nanog在肿瘤干细胞自我更新中的核心调控位置，并揭示了其发挥作用的相关调控分子，为靶向肿瘤干细胞提供了理论支持