Tim-1和Tim-3信号通路在炎症性肠病中的作用

IBD的发病机制非常复杂，我们的前期研究和文献报道Th免疫反应和TLR信号通路异常在其中起重要作用，并且这些异常在不同类型的IBD（CD和UC）中有所不同，但是其发生机制尚不清楚。为何不同类型的IBD会出现不同的Th优势反应，它们的调控机制不明。Tim-1和Tim-3信号通路是新发现的调节Th免疫反应的核心环节，并且与TLR信号通路密切相关。然而Tim-1和Tim-3信号通路在IBD发生发展中的作用，及它们与IBD的Th免疫反应和TLR信号通路变化的关系国内外未见报道。为此，本项目拟研究不同类型IBD模型中Tim-1和Tim-3信号通路的变化及其与Th免疫反应和TLR信号通路的关系，并以它们为干预靶点，分别观察阻断和促进Tim-1和Tim-3信号通路对不同类型IBD的Th免疫反应和TLR信号通路的影响，及其与疾病的的关系，从一新的角度探讨IBD的发病机制，为IBD的防治提供新的靶点和方向。

TLRs信号通路、Treg和Th反应参与了炎症性肠病致病，Tim信号路与上述3个环节可相互调控。为此本项目主要进行了已下三方面的研究：⑴Tim-3信号通路在小鼠实验性结肠炎中作用；⑵Tim-1信号通路在小鼠实验性结肠炎中作用；⑶Tim-3和Tim-1过表达对鼠源性巨噬细胞内TLRs/LPS信号通路的影响。得出以下结论：⑴Tim-3抗体预处理后可减轻小鼠实验性结肠炎，而给予其配体Gal-9则可加剧小鼠实验性结肠炎，提示Tim-3信号通路参与了小鼠实验性结肠炎的致病；⑵Tim-3抗体预处理后小鼠实验性结肠炎肠黏膜中Foxp3蛋白表达增加，TLR4、MyD88、NF-κBp65蛋白表达下降，SIGIRR蛋白表达上升，肠黏膜局部促炎细胞因子含量降低，抑炎细胞因子含量增加；而Gal-9的作用则反之。提示Tim-3信号通路可能通过调控TLR4/NF-κB信号通路、Treg反应和不同类型细胞因子的分泌，从而影响小鼠实验性结肠炎的发生发展；⑶Tim-1抗体预处理可加剧小鼠实验性结肠炎，而给予其配体Tim-4则减轻小鼠实验性结肠炎，提示Tim-1信号通路参与了小鼠实验性结肠炎的致病；⑷Tim-1抗体预处理后小鼠实验性结肠炎肠黏膜中Foxp3蛋白表达降低，TLR4、NF-κB p65、MyD88等表达上调，促炎细胞因子含量增加，抑炎细胞因子含量降低；而Tim-4的作用则反之。提示Tim-1抗体可能通过调控TLR4/NF-κB信号通路、Treg反应和不同类型细胞因子的分泌，从而影响小鼠实验性结肠炎的发生发展；⑸LPS可激活小鼠巨噬细胞TLR4/NF-κB信号通路及上调Tim-3的表达，促进促炎因子分泌；Tim-3过表达可增强LPS作用的小鼠巨噬细胞TLR4/NF-κB信号通路的激活，并促进促炎因子分泌，而在无LPS作用时Tim-3过表达并不影响巨噬细胞的功能；Tim-1过表达可抑制LPS作用的小鼠巨噬细胞TLR4/NF-κB信号通路的激活，并减少促炎因子分泌，而在无LPS作用时Tim-1过表达并不影响巨噬细胞的功能。以上研究结果证实了Tim信号通路通过调控TLRs信号通路、Treg和Th反应参与了小鼠实验性结肠炎的致病，为以Tim信号通路为靶点防治炎症性肠病提供了实验依据。